第1章 桿狀病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡及RNAi技術(shù)
1.1 核多角體病毒
1.2 桿狀病毒感染與宿主的關(guān)系
1.3 桿狀病毒宿主專(zhuān)一性
1.4 細(xì)胞凋亡概念及其形態(tài)學(xué)特征
1.5 細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的區(qū)別
1.6 細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制
1.7 桿狀病毒感染引起的細(xì)胞凋亡研究
1.8 抗凋亡基因
1.8.1 p35基因
1.8.2 p49基因
1.8.3 iap基因
1.9 RNAi技術(shù)
1.9.1 RNAi的發(fā)現(xiàn)與發(fā)展
1.9.2 RNAi作用機(jī)制
1.9.3 RNAi機(jī)制中的主要成員
1.9.4 用RNAi方法研究特定基因功能的技術(shù)路線
第2章 Splt-iap4、Splt-p49的基因轉(zhuǎn)錄和翻譯研究
2.1 材料與方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 Splt-iap4轉(zhuǎn)錄時(shí)相
2.2.2 Splt-p49轉(zhuǎn)錄時(shí)相
2.2.3 Splt-iap4表達(dá)時(shí)相
2.2.4 Splt-p49表達(dá)時(shí)相
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第3章 應(yīng)用RNAi技術(shù)研究Splt-iap4和Splt-p49基因功能
3.1 材料與方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 結(jié)果
3.2.1 Splt-iap4和Splt-p49基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
3.2.2 對(duì)照cat基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
3.2.3 重組質(zhì)粒p28i-p49和p28i-iap4的酶切鑒定
3.2.4 重組質(zhì)粒p28i-cat的酶切鑒定
3.2.5 Splt-P49和Splt-IAP4凋亡功能檢測(cè)
3.2.6 Splt-IAP4蛋白沒(méi)有協(xié)同抗凋亡作用
3.2.7 Splt-IAP4對(duì)細(xì)胞有聚集作用
3.2.8 Splt-iap4 dsRNA處理對(duì)產(chǎn)生感染性病毒粒子的影響
3.2.9 RNAi對(duì)SpltNPV感染SpLi-221細(xì)胞的影響
3.3 討論
3.4 小結(jié)
第4章 Splt-iap4和Splt-p49瞬時(shí)表達(dá)及抗細(xì)胞凋亡活性研究
4.1 材料與方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 瞬時(shí)表達(dá)載體的構(gòu)建
4.2.2 瞬時(shí)表達(dá)蛋白檢測(cè)
4.2.3 Splt-IAP4和Splt-P49抗凋亡活性檢測(cè)
4.3 討論
4.4 小結(jié)
第5章 桿狀病毒與抗凋亡基因的進(jìn)化關(guān)系研究
5.1 材料與方法
5.1.1 材料
5.1.2 方法
5.2 結(jié)果與分析
5.2.1 43株桿狀病毒全基因組特征
5.2.2 43株桿狀病毒全基因組中的抗凋亡基因
5.2.3 iap的序列比對(duì)和進(jìn)化分析
5.3 討論
5.4 小結(jié)
第6章 SpltNPV感染誘導(dǎo)Se301細(xì)胞凋亡的檢測(cè)與分析
6.1 材料與方法
6.1.1 材料
6.1.2 方法
6.2 結(jié)果與分析
6.2.1 光學(xué)顯微鏡觀察SpltNPV感染Se301細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化
6.2.2 電子顯微鏡觀察SpltNPV感染Se301細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化
6.2.3 DAPI染色
6.2.4 臺(tái)盼藍(lán)(trypan blue)染色
6.2.5 DNA ladder
6.2.6 滴度測(cè)定
6.2.7 dot blotting
6.2.8 RT-PCR
6.2.9 SDS-PAGE和western blotting分析
6.3 討論
6.4 小結(jié)
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
縮略詞