目錄
第一章 基本實驗操作及常用儀器使用 1
第一節(jié) 常用研究技術(shù) 1
第二節(jié) 基本實驗操作 24
第三節(jié) 常用儀器使用 32
第四節(jié) 實驗室規(guī)則及安全防護 43
第五節(jié) 如何撰寫實驗報告 44
第二章 經(jīng)典驗證性實驗 46
第一節(jié) 蛋白質(zhì)定量分析實驗 46
實驗一 微量凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量 46
實驗二 雙縮脲法測定血清蛋白質(zhì)含量 49
實驗三 Folin-酚試劑法測定蛋白質(zhì)含量 50
實驗四 紫外分光光度法測定蛋白質(zhì)濃度 52
實驗五 BCA法測定蛋白質(zhì)濃度 54
第二節(jié) 層析實驗 56
實驗六 紙層析法觀察轉(zhuǎn)氨基作用 56
實驗七 葡聚糖凝膠柱層析分離血紅蛋白與魚精蛋白 58
實驗八 離子交換層析分離混合氨基酸 60
實驗九 薄層層析分離鑒定氨基酸 61
第三節(jié) 電泳實驗 64
實驗十 血清醋酸纖維薄膜電泳 64
實驗十一 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清LDH同工酶 67
實驗十二 SDS-PAGE測定蛋白質(zhì)的相對分子量 72
第四節(jié) 酶學(xué)實驗 74
實驗十三 血清堿性磷酸酶活性測定 75
實驗十四 血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性測定 77
實驗十五 胰酶對蛋白質(zhì)的消化和影響酶作用的因素 79
實驗十六 丙二酸對琥珀酸脫氫酶的競爭性抑制作用 82
實驗十七 Hg2+對脲酶的抑制作用 84
實驗十八 酶米氏常數(shù)的測定 86
第五節(jié) 糖與脂質(zhì) 87
實驗十九 血糖濃度的測定 88
實驗二十 腎上腺素對血糖濃度的影響 90
實驗二十一 血清三酰甘油濃度測定 91
實驗二十二 血清總膽固醇濃度測定 94
實驗二十三 血清載脂蛋白apoA1的測定 98
實驗二十四 血清過氧化脂質(zhì)的測定 99
實驗二十五 血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳 101
第六節(jié) 核酸分離純化技術(shù) 102
實驗二十六 基因組DNA的提取制備與檢測 102
實驗二十七 全血基因組DNA的試劑盒法提取制備與檢測 106
實驗二十八 總RNA的提取制備與檢測 108
實驗二十九 質(zhì)粒DNA的提取制備與檢測 111
實驗三十 動物組織核酸的提取及成分鑒定 115
第七節(jié) PCR技術(shù) 117
實驗三十一 常規(guī)PCR技術(shù) 117
實驗三十二 定量PCR技術(shù) 120
第八節(jié) 基因克隆技術(shù) 123
實驗三十三 凝膠中DNA片斷的純化回收 123
實驗三十四 DNA的限制性酶切與電泳 124
實驗三十五 DNA連接實驗 127
實驗三十六 感受態(tài)細(xì)胞的制備 130
實驗三十七 重組DNA轉(zhuǎn)化與藍白斑篩選 131
第九節(jié) 分子雜交與印跡技術(shù) 133
實驗三十八 核酸原位雜交 133
實驗三十九 Southern印跡雜交 139
實驗四十 Northern印跡雜交 142
實驗四十一 Western印跡 145
第十節(jié) 細(xì)胞結(jié)構(gòu) 147
實驗四十二 動植物細(xì)胞的基本形態(tài)與結(jié)構(gòu)及細(xì)胞顯微測量 147
實驗四十三 細(xì)胞內(nèi)幾種細(xì)胞器的觀察 151
實驗四十四 小白鼠巨噬細(xì)胞吞噬實驗 152
實驗四十五 細(xì)胞內(nèi)幾種化學(xué)成分的顯示 153
實驗四十六 細(xì)胞骨架系統(tǒng)的顯示與觀察 155
實驗四十七 細(xì)胞膜的通透性的觀察 157
第十一節(jié) 細(xì)胞增殖 158
實驗四十八 細(xì)胞融合實驗 158
實驗四十九 細(xì)胞有絲分裂觀察 159
實驗五十 細(xì)胞原代培養(yǎng) 161
實驗五十一 細(xì)胞傳代培養(yǎng) 163
實驗五十二 培養(yǎng)細(xì)胞的凍存、復(fù)蘇與運輸 163
第十二節(jié) 醫(yī)學(xué)遺傳 164
實驗五十三 人類某些遺傳性狀的觀察及皮膚紋理分析 165
實驗五十四 人類染色體照片核型分析 171
實驗五十五 染色體G顯帶染色體的核型分析 173
實驗五十六 人類染色體鏡下核型分析 176
第三章 綜合性實驗 178
實驗一 血清γ-球蛋白的分離純化及鑒定 178
實驗二 堿性磷酸酶的分離純化與動力學(xué)研究 183
實驗三 hCS基因在大腸埃希菌中的表達、純化及鑒定 187
實驗四 hCS基因在畢赤酵母中的表達及鑒定 192
實驗五 熒光原位雜交實驗 195
實驗六 用雙熒光素酶報告基因檢測啟動子活性 198
實驗七 電泳遷移阻滯實驗 201
實驗八 染色質(zhì)免疫沉淀 205
實驗九 蛋白質(zhì)雙向電泳 209
實驗十 肝癌組織的代謝組學(xué)分析 214
實驗十一 酵母雙雜交實驗 218
實驗十二 RNA干擾實驗 220
實驗十三 人類外周血染色體標(biāo)本的制備觀察 224
實驗十四 人類惡性腫瘤染色體標(biāo)本的制備觀察 225
實驗十五 羊水細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本的制備觀察 226
實驗十六 人精子染色體標(biāo)本制備 228
實驗十七 綠色熒光蛋白標(biāo)記的融合蛋白轉(zhuǎn)染及觀察 230
第四章 創(chuàng)新性實驗 231
實驗一 重要蛋白質(zhì)或酶的分離純化 231
實驗二 家族性高膽固醇血癥的診斷 231
實驗三 血友病的分子診斷 233
實驗四 RNA干擾技術(shù)靶向沉默目的基因 233
實驗五 家系調(diào)查和遺傳病的系譜分析 234
實驗六 藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的檢測實驗 236
主要參考文獻 237