醫(yī)學細胞生物學的理論和技術(shù)是醫(yī)學科學知識結(jié)構(gòu)的重要組成部分。本教材涵蓋了細胞生物學常用實驗技術(shù)中與基礎(chǔ)和臨床醫(yī)學關(guān)系密切的內(nèi)容，設(shè)基本實驗和綜合實驗上下兩篇。上篇為基本實驗，對每個基本實驗的目的、基本原理、操作流程和實驗結(jié)果作了比較詳細的介紹；而下篇則根據(jù)學科的進展和未來發(fā)展趨勢，結(jié)合自身的教學和科研體驗，歸納出可操作性較強，體現(xiàn)出學科間交叉滲透特點的綜合實驗。因此，本教材既可以作為學生的教科書，也能成為他們?nèi)蘸蟮膶嶒瀰⒖紩��?

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目錄
上篇 基本實驗
第一章 顯微鏡的構(gòu)造和使用 1
實驗1-1 普通光學顯微鏡的構(gòu)造、使用方法及細胞基本形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察 1
實驗1-2 倒置相差顯微鏡的構(gòu)造與使用 5
實驗1-3 顯微鏡測微尺的使用 8
第二章 流式細胞儀技術(shù)與應用 14
實驗2-1 流式細胞儀結(jié)構(gòu)原理及應用 14
實驗2-2 流式細胞儀檢測細胞周期 18
實驗2-3 流式細胞儀檢測細胞凋亡 19
實驗2-4 流式細胞儀檢測細胞中抗原——流式細胞術(shù)檢測T淋巴細胞亞群 21
第三章 細胞器結(jié)構(gòu)的觀察與分離 24
實驗3-1 細胞器結(jié)構(gòu)的觀察 24
實驗3-2 細胞器分級分離 31
第四章 細胞化學方法和細胞化學成分顯示 34
實驗4-1 細胞化學基本理論 34
實驗4-2 細胞中骨架蛋白的顯示與細胞形態(tài)的觀察 37
實驗4-3 Feulgen法顯示脫氧核糖核酸 39
實驗4-4 甲基綠-派洛寧顯示核酸 41
實驗4-5 蘇木素-伊紅染色顯示細胞核和細胞質(zhì) 42
第五章 酶細胞化學 45
實驗5-1 酶細胞化學的基本原理 45
實驗5-2 堿性磷酸酶顯示及用途 47
實驗5-3 聯(lián)苯胺法顯示過氧化物酶及應用 49
實驗5-4 詹納斯綠顯示活體細胞線粒體 50
實驗5-5 利用琥珀酸脫氫酶活性進行MTT檢測細胞相對存活率 51
實驗5-6 CCK8檢測技術(shù) 53
第六章 免疫化學技術(shù) 56
實驗6-1 免疫酶細胞化學法檢測髓母細胞瘤細胞系中P65蛋白的表達 56
實驗6-2 免疫熒光染色顯示髓母細胞瘤細胞系中HES1蛋白的分布 58
實驗6-3 免疫組織化學法檢測HES1在胃癌組織中的表達與分布 60
第七章 細胞遺傳學技術(shù) 64
實驗7-1 人類性染色質(zhì)標本的制備與觀察 64
實驗7-2 人外周血淋巴細胞培養(yǎng)與染色體制備 66
實驗7-3 小鼠骨髓細胞染色體標本的制備與觀察 69
實驗7-4 染色體G顯帶技術(shù) 70
實驗7-5 核型分析 74
第八章 細胞培養(yǎng)技術(shù) 77
實驗8-1 細胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù) 77
實驗8-2 細胞的原代培養(yǎng) 84
實驗8-3 傳代細胞培養(yǎng) 85
實驗8-4 培養(yǎng)細胞的形態(tài)觀察和計數(shù) 87
實驗8-5 細胞凍存、復蘇與運輸 90
實驗8-6 細胞克隆化培養(yǎng) 92
實驗8-7 細胞三維培養(yǎng) 94
第九章 細胞行為學 99
實驗9-1 細胞吞噬實驗 99
實驗9-2 細胞融合實驗 101
實驗9-3 細胞周期 106
實驗9-4 小鼠減數(shù)分裂 109
實驗9-5 細胞周期特定時相細胞同步化方法 113
實驗9-6 細胞運動的觀察 116
實驗9-7 腫瘤細胞的遷移和侵襲試驗——Transwell小室測定法 118
第十章 細胞衰老和凋亡的檢測 120
實驗10-1 蘇木素-伊紅染色法顯示凋亡細胞 120
實驗10-2 Giemsa染色法顯示凋亡細胞 122
實驗10-3 凋亡細胞的原位末端轉(zhuǎn)移酶標記法（TUNEL法） 123
實驗10-4 細胞凋亡的瓊脂糖凝膠電泳檢測 125
實驗10-5 細胞衰老的檢測 127
第十一章 蛋白質(zhì)的分離與測定 129
實驗11-1 真核細胞蛋白質(zhì)提取 129
實驗11-2 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)濃度 131
實驗11-3 福林-酚法測定蛋白質(zhì)濃度 132
實驗11-4 考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)濃度 134
實驗11-5 蛋白質(zhì)印跡免疫分析（Western blot） 135
第十二章 核酸的分離、測定與分析 139
實驗12-1 真核生物組織及細胞基因組DNA提取 139
實驗12-2 組織及細胞中RNA的提取 140
實驗12-3 DNA與RNA含量測定 142
實驗12-4 聚合酶鏈反應技術(shù)（PCR）體外擴增DNA片段 143
實驗12-5 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應（RT-PCR） 145
實驗12-6 實時定量PCR（Real time-PCR） 148
下篇 綜合實驗
第十三章 小鼠胚胎干細胞培養(yǎng) 152
實驗13-1 小鼠胚胎成纖維細胞的培養(yǎng) 152
實驗13-2 飼養(yǎng)層細胞的制備 154
實驗13-3 小鼠胚胎干細胞的分離及培養(yǎng) 155
第十四章 IL-6剝奪誘導小鼠B細胞雜交瘤細胞系7TD1細胞凋亡、觀察及檢測 157
實驗14-1 小鼠B細胞雜交瘤細胞系7TD1細胞復蘇與傳代培養(yǎng) 158
實驗14-2 7TD1細胞的凋亡誘導（IL-6剝奪）及細胞收集 160
實驗14-3 IL-6剝奪誘導7TD1細胞凋亡的形態(tài)特征觀察 161
實驗14-4 IL-6剝奪誘導7TD1細胞凋亡的DNA提取及凋亡梯狀帶檢測 164
第十五章 觀察白藜蘆醇對髓母細胞瘤細胞分化、運動、凋亡的影響及相關(guān)基因的檢測 168
實驗15-1 細胞的培養(yǎng)與傳代 168
實驗15-2 白藜蘆醇處理前后細胞數(shù)量和形態(tài)的觀察以及免疫細胞化學染色 170
實驗15-3 白藜蘆醇對髓母細胞瘤細胞遷移能力的影響 172
實驗15-4 總RNA提取和分化相關(guān)基因突觸素（synaptophysin）的RT-PCR檢測 173
第十六章 小鼠表皮細胞原代培養(yǎng)及免疫熒光檢測 175
實驗16-1 細胞原代培養(yǎng)（消化法） 175
實驗16-2 細胞傳代 176
實驗16-3 細胞的處理及免疫熒光法檢測E-cadherin 177
實驗16-4 細胞的顯微攝影 179
第十七章 應用基因重組技術(shù)在真核細胞中表達和檢測p53基因 182
實驗17-1 目的基因p53 PCR擴增及瓊脂糖凝膠電泳檢測 183
實驗17-2 目的基因p53片段純化回收與重組表達載體連接、轉(zhuǎn)化、篩選及重組質(zhì)粒提取 184
實驗17-3 培養(yǎng)細胞轉(zhuǎn)染目的基因表達載體 187
實驗17-4 Western blot方法檢測外源目的基因p53表達 188
附錄 191
附錄一 試劑濃度的表示方法及其計算 191
附錄二 常用人工合成細胞培養(yǎng)基的種類、化學組成及適用細胞 193
附錄三 實驗室常用細胞系（株） 196
附錄四 離心機轉(zhuǎn)數(shù)與離心力的換算表 199