《基因工程/高等學(xué)校生物技術(shù)、生物工程系列教材》系統(tǒng)闡述了基因工程的基本理論與實(shí)用技術(shù),以基因工程四大要素(工具酶、載體、供體、受體)為基礎(chǔ),以基因工程操作流程為主線,涵蓋了核酸提取、靶基因克隆、基因重組、基因誘導(dǎo)表達(dá)、表達(dá)蛋白質(zhì)的純化、動(dòng)植物轉(zhuǎn)基因,以及基因工程應(yīng)用等內(nèi)容。此外,還介紹了支撐該學(xué)科發(fā)展的一些常用和最新的技術(shù),如各種電泳技術(shù)、第1~3代測序技術(shù)、噬菌體展示技術(shù)、酵母雙雜交技術(shù)、RNA干擾技術(shù)、基因靶向技術(shù),以及基因組、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組的基因表達(dá)譜的研究技術(shù)等前沿?zé)狳c(diǎn)。 與書配套的數(shù)字課程提供以下拓展資源:與教材內(nèi)容相關(guān)的彩圖及拓展閱讀資料,各章思考題的解題要點(diǎn)與思路,中英文名詞及縮寫,菌株學(xué)名,參考文獻(xiàn),相關(guān)網(wǎng)站等。 《基因工程/高等學(xué)校生物技術(shù)、生物工程系列教材》條理清晰,內(nèi)容新穎,具有較好的系統(tǒng)性、先進(jìn)性與教學(xué)適用性,可供高等學(xué)校生命科學(xué)相關(guān)專業(yè)的師生作為教材使用,也可供研究人員參考。
緒論
一、基因工程研究進(jìn)展
二、遺傳物質(zhì)的性質(zhì)與存在方式
三、基因及基因表達(dá)
第一章 工具酶
第一節(jié) 限制與修飾酶
一、限制性內(nèi)切酶
二、甲基化酶
第二節(jié) DNA連接酶
第三節(jié) 聚合酶
一、DNA聚合酶
二、RNA聚合酶
第四節(jié) 核酸酶
第五節(jié) 核酸末端修飾酶
第六節(jié) 其他酶
第二章 分子克隆載體
第一節(jié) 質(zhì)粒載體
一、概述
二、幾種重要的質(zhì)粒
第二節(jié) 噬菌體載體
一、入噬菌體
二、黏粒
三、絲狀噬菌體
四、噬菌粒
第三節(jié) 真核生物載體
一、酵母載體
二、植物細(xì)胞載體
三、動(dòng)物細(xì)胞載體
第四節(jié) 人工染色體
第三章 核酸提取與基因文庫構(gòu)建
第一節(jié) 核酸的制備
一、核酸的提取
二、核酸的檢測
第二節(jié) 基因文庫的構(gòu)建
一、基因文庫
二、構(gòu)建基因文庫的載體
三、基因組文庫的構(gòu)建
四、cDNA文庫的構(gòu)建
五、微量樣品cDNA文庫的構(gòu)建
六、基因組文庫與cDNA文庫的適用范圍與差別
第四章 靶基因的克隆策略
第一節(jié) 靶基因的克隆
一、靶基因的部分片段獲取
二、PCR合成法
三、核酸探針篩選
四、基因功能篩選
五、圖位克隆法
六、人工化學(xué)合成法
第二節(jié) 克隆基因的序列分析
一、DNA序列測定
二、基因序列分析
第五章 體外DNA重組
第一節(jié) DNA重組
一、載體的選擇
二、靶基因的獲取
三、DNA的體外重組
第二節(jié) 重組DNA導(dǎo)入宿主
一、宿主的選擇
二、重組DNA導(dǎo)入宿主
第三節(jié) 陽性重組體的篩選與鑒定
一、平板篩選法
二、電泳篩選法
三、PCR篩選法
四、測序確認(rèn)
五、報(bào)告基因檢測法
六、核酸探針篩選法
七、基因定點(diǎn)突變
第六章 靶基因的誘導(dǎo)表達(dá)
第一節(jié) 外源基因表達(dá)涉及的因素
一、正確的閱讀框
二、靶基因的有效轉(zhuǎn)錄
三、靶基因轉(zhuǎn)錄的終止
四、mRNA的有效翻譯
五、密碼子的利用與偏愛
六、翻譯后的修飾加工及表達(dá)蛋白的分泌
七、蛋白質(zhì)大小與融合標(biāo)簽
第二節(jié) 大腸桿菌表達(dá)體系
一、表達(dá)載體
二、表達(dá)用的宿主菌
第三節(jié) 外源基因在大腸桿菌中的表達(dá)
一、表達(dá)重組載體的構(gòu)建
二、外源基因的誘導(dǎo)表達(dá)
三、大腸桿菌中外源基因的表達(dá)類型
四、外源基因表達(dá)的檢測
第四節(jié) 外源基因在真核生物中的表達(dá)
一、酵母表達(dá)體系
二、動(dòng)植物細(xì)胞表達(dá)體系
第七章 表達(dá)蛋白的純化
第一節(jié) 蛋白質(zhì)純化
一、細(xì)胞破碎
二、破胞后處理
三、蛋白質(zhì)濃縮
四、蛋白質(zhì)分離
第二節(jié) 蛋白質(zhì)分析
一、SDS-PAGE分析
二、Westem雜交
三、蛋白質(zhì)含量測定
四、蛋白質(zhì)濃縮與貯存
第八章 轉(zhuǎn)基因
第一節(jié) 植物轉(zhuǎn)基因
一、植物轉(zhuǎn)基因的載體
二、植物轉(zhuǎn)基因的受體
三、DNA重組
四、外源DNA導(dǎo)入植物細(xì)胞
五、植物轉(zhuǎn)基因篩選與植株分化
第二節(jié) 動(dòng)物轉(zhuǎn)基因
一、表達(dá)載體
二、哺乳動(dòng)物細(xì)胞
三、外源基因?qū)藙?dòng)物細(xì)胞
四、外源基因的誘導(dǎo)表達(dá)
第九章 基因組、轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組的研究
第一節(jié) 基因組
一、測序文庫的構(gòu)建
二、基因組測序
三、測序后數(shù)據(jù)組裝
四、內(nèi)洞修補(bǔ)、拼接
五、全基因組注釋
第二節(jié) 轉(zhuǎn)錄組
一、微陣列技術(shù)
二、SAGE和MPSS技術(shù)
三、轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)
第三節(jié) 蛋白質(zhì)組
一、雙向電泳
二、生物質(zhì)譜技術(shù)
三、SILAC技術(shù)
四、iTRAQ技術(shù)
五、蛋白質(zhì)芯片技術(shù)
六、酵母雙雜交技術(shù)
七、噬菌體展示技術(shù)
八、基因靶向
第十章 基因工程應(yīng)用與思考
第一節(jié) 基因工程的應(yīng)用
一、醫(yī)藥衛(wèi)生
二、農(nóng)牧業(yè)、食品工業(yè)
三、環(huán)境保護(hù)
第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因的安全性分析
一、剖析與轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全性有關(guān)的十大事件
二、轉(zhuǎn)基因的安全性問題
三、轉(zhuǎn)基因的安全性管理
參考文獻(xiàn)
索引