本書分為免疫標記技術(shù)基于組織學技術(shù)方法的免疫分析技術(shù)基于電泳技術(shù)方法的免疫分析技術(shù)抗體的制備、純化及標記技術(shù)層析技術(shù)用于免疫細胞分析的通用技術(shù)各類免疫細胞分離、功能檢測技術(shù)及免疫學實驗技術(shù)的綜合應用8個部分。從分子、細胞、動物等幾個層面分別介紹免疫學實驗技術(shù)的基本原理及操作步驟。在實驗技術(shù)的選擇上,力求結(jié)合科研實踐及發(fā)展前沿,在內(nèi)容撰寫時,力求言簡意賅、通俗易懂,同時,在每節(jié)附有免疫學技術(shù)在科研應用中的實際案例,期望幫助學生開闊視野、提高知識的應用能力。免疫學實驗技術(shù)的綜合應用章節(jié)包含了4個先后接續(xù)的實驗,可作為一個完整的課題型實驗應用于免疫學實驗課的實際教學中。本書可作為高等院校生物學及醫(yī)學相關(guān)專業(yè)本科生、研究生的免疫學實驗課教材使用。
免疫學實驗技術(shù)原理與應用作為生物醫(yī)學研究領(lǐng)域中發(fā)展最為迅速的學科之一,免疫學已成為生物醫(yī)藥專業(yè)本科生及研究生教育中非常重要的專業(yè)課。目前,國內(nèi)雖有眾多免疫學基礎(chǔ)理論及實驗教材出版,但大多著眼于醫(yī)藥專業(yè)學生的需求,鮮見結(jié)合生物醫(yī)學科研實踐、為即將從事生命科學基礎(chǔ)研究的學生所編寫的實驗技術(shù)類教材。但作為一門實踐學科,免疫學基礎(chǔ)理論的學習如果脫離實驗研究,將很難實現(xiàn)學生對核心知識的真正掌握及未來對理論知識的靈活運用。因此,編寫一本適合生物學、生物技術(shù)、生物工程、生物醫(yī)學工程等專業(yè)學生的免疫學實驗技術(shù)教材,十分迫切和必要。目前已出版的免疫學實驗技術(shù)類書籍主要包括兩大類。一類以精講免疫學技術(shù)原理為主,如中國科學家曹雪濤教授主編的《免疫學技術(shù)及其應用》、美國科學家JE科利根教授主編的《精編免疫學實驗指南》等。這類書籍力求全面、詳細地介紹各類免疫學實驗技術(shù)和方法,內(nèi)容非常翔實,篇幅往往以百萬字計,更適合作為一線科研工作者的實驗參考工具書。另一類則是以介紹免疫學實驗技術(shù)的基本原理、基本操作為主,但這類書籍有關(guān)免疫學實驗原理的介紹較為簡略,因此,這類書籍可作為本科生實驗課程的縮略版參考資料。以上兩類書籍均不太適用于綜合類院校生物專業(yè)本科生及研究生免疫學實驗課程的需求。本教材編者本著OBE教學理念,基于我校及兄弟院校生物相關(guān)專業(yè)本科生及研究生的學習背景,結(jié)合學生未來職業(yè)發(fā)展需求,以免疫學原理在實際生物醫(yī)學科研中的應用為總體編寫思路,在參考同類優(yōu)秀教材基礎(chǔ)上,完成了本教材的編寫。本教材的主要特點為,較為詳盡地介紹了各類免疫學技術(shù)的實驗原理及實驗操作步驟,并在大部分實驗技術(shù)章節(jié)中添加了已公開發(fā)表的免疫學技術(shù)在實際科研工作中的應用案例,從而幫助學生拓寬視野、更加深入地理解相關(guān)的免疫學實驗技術(shù)原理、提升免疫學實驗技術(shù)的應用能力。本書第8章以一個實際的科研應用為出發(fā)點,由4個前后接續(xù)的免疫學實驗所構(gòu)成,可作為生物類院校免疫學實驗課綜合應用環(huán)節(jié)的參考。本書編者由衷希望本書能夠成為適于各綜合性高校生物專業(yè)的通用教材,同時也能兼供醫(yī)學專業(yè)學生參考。感謝北京理工大學教務處和生命學院的相關(guān)領(lǐng)導、同事們對本書編寫工作的大力支持和指導。在本書撰寫過程中,北京理工大學生命學院呂芳副教授及李玉娟副教授在層析技術(shù)章節(jié)及各章節(jié)中涉及的動物實驗操作技術(shù)、免疫分子檢測分析技術(shù)等部分完成了大量的文字撰寫、資料查閱、圖片處理及后期文字校對等工作;北京理工大學生命學院任浩同學及萬眾同學在每章節(jié)知識窗部分完成了文獻查閱、部分文字撰寫等工作;北京理工大學生命學院陳厶文、那扎開提·帕力哈提等同學完成了本教材的格式整理、文字校對等較為繁雜的工作,在此對幾位老師及同學的辛勤付出表示感謝。本書中插圖大多參考自免疫學專家、名師編著的同類教材,本書編者結(jié)合自身需求略加修改,在此謹對這些教材的編者們表示衷心感謝。附錄中實驗耗材和儀器設(shè)備的圖片均來源于各大相關(guān)生物公司網(wǎng)站,在此一并表示感謝!由于編者學識有限,教材編寫過程中難免出現(xiàn)不足之處,真誠希望各位同行及讀者不辭吝教、批評指正!
王睿,女,北京理工大學生命學院教師。2007年畢業(yè)于北京協(xié)和醫(yī)學院,獲免疫學專業(yè)博士學位。2007年9月進入北京理工大學工作至今,持續(xù)開展空間生物學效應免疫學機理研究,主持或參與多項國※級、校級研究項目,發(fā)表多篇學術(shù)研究論文。多年來獨立講授《免疫學》、《人體解剖生理學》、《生命科學基礎(chǔ)》等多門本科生及研究生課程,建設(shè)慕課《基礎(chǔ)免疫學》,授課效果得到歷屆學生好評。教學工作中注重教學方法研究及教學技能提升,多次在省部級、校級教學基本功大賽中獲獎,如2017年榮獲北京高校第十屆青年教師基本功比賽二等獎、全國高校生命科學類微課教學比賽一等獎和教學風采獎、第二屆三聯(lián)杯中國生化與分子生物學微課競賽二等獎等獎項。
1.1酶免疫技術(shù)001
1.2放射免疫技術(shù)007
1.3化學發(fā)光免疫分析技術(shù)012
第2章基于組織學技術(shù)方法的免疫分析技術(shù)014
2.1免疫組織(細胞)化學技術(shù)014
2.2免疫電鏡技術(shù)017
2.3免疫熒光技術(shù)020
第3章基于電泳技術(shù)方法的免疫分析技術(shù)025
3.1免疫印跡技術(shù)025
3.2免疫共沉淀技術(shù)033
第4章抗體的制備、純化及標記技術(shù)037
4.1多克隆抗體的制備038
4.2單克隆抗體的制備及純化040
第5章層析技術(shù)048
5.1凝膠過濾層析048
5.2離子交換層析050
5.3親和層析054
5.4具體實驗舉例056
第6章用于免疫細胞分析的通用技術(shù)062
6.1流式細胞分析檢測技術(shù)062
6.2免疫細胞凋亡檢測技術(shù)071
第7章各類免疫細胞分離、功能檢測技術(shù)082
7.1淋巴細胞的分離純化082
7.2T淋巴細胞增殖反應090
7.3巨噬細胞的分離、體外培養(yǎng)及功能檢測技術(shù)096
7.4樹突狀細胞的分離、體外培養(yǎng)及功能檢測技術(shù)104
7.5自然殺傷性細胞的分離及功能檢測技術(shù)109
第8章免疫學實驗技術(shù)的綜合應用117
8.1CIA小鼠模型的制備118
8.2CIA小鼠關(guān)節(jié)炎癥及外周血中炎癥因子的測定121
8.3CIA小鼠適應性免疫功能的測定125
8.4CIA小鼠膝關(guān)節(jié)中巨噬細胞的測定129
附錄Ⅰ免疫學實驗中的常用工具及耗材132
附錄Ⅱ常用實驗設(shè)備134