本書由植物細(xì)胞工程實驗技術(shù)篇和動物細(xì)胞工程實驗技術(shù)篇共44個實驗組成。植物細(xì)胞工程實驗技術(shù)篇由基礎(chǔ)性實驗、綜合性實驗和設(shè)計性實驗三章組成;A(chǔ)性實驗涉及細(xì)胞、組織和器官分離培養(yǎng)至成苗馴化移栽,花器官的觀察及培養(yǎng)物超低溫保存等;綜合性實驗含微型馬鈴薯及單倍體誘導(dǎo),胚培養(yǎng)及原生質(zhì)體融合培養(yǎng),農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化和原生質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)化等;設(shè)計性實驗包括植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對植物離體器官形態(tài)建成的影響、植物的脫毒培養(yǎng)與離體快繁技術(shù)研究、植物體細(xì)胞無性系誘導(dǎo)與突變體篩選三個實驗。動物細(xì)胞工程實驗技術(shù)篇由動物細(xì)胞培養(yǎng)基本技術(shù)和雜交瘤與單克隆抗體制備技術(shù)兩章組成。其中動物細(xì)胞培養(yǎng)囊括了動物細(xì)胞培養(yǎng)較完整的基本技術(shù)體系;雜交瘤與單克隆抗體制備技術(shù)由細(xì)胞制備,細(xì)胞融合和雜交瘤細(xì)胞篩選,單克隆抗體檢測,雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng),單克隆抗體制備與分離、純化等7個實驗組成。本書實驗方法先進(jìn)可靠,實驗步驟詳細(xì)易操作,具有較廣泛的適應(yīng)性和實用性。
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目錄
第一篇 植物細(xì)胞工程實驗技術(shù)
第一章 基礎(chǔ)性實驗 2
實驗1-1 植物培養(yǎng)基母液的配制 2
實驗1-2 植物培養(yǎng)基的制備 7
實驗1-3 植物外植體的初代培養(yǎng) 12
實驗1-4 植物離體培養(yǎng)物的繼代培養(yǎng)與觀察 17
實驗1-5 植物根的液體懸浮培養(yǎng) 24
實驗1-6 試管苗的生根培養(yǎng) 26
實驗1-7 試管苗的馴化與移栽 29
實驗1-8 莖尖生長點的剝離、觀察與培養(yǎng) 31
實驗1-9 花粉發(fā)育時期的鑒定 35
實驗1-10 植物花器官與胚器官的剝離與觀察 40
實驗1-11 植物離體授粉技術(shù) 43
實驗1-12 植物單細(xì)胞的分離與培養(yǎng) 48
實驗1-13 植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系的建立 52
實驗1-14 植物細(xì)胞的生長計量技術(shù) 55
實驗1-15 植物細(xì)胞活力的鑒定 61
實驗1-16 微藻細(xì)胞的培養(yǎng) 63
實驗1-17 植物離體培養(yǎng)物與莖尖生長點的超低溫保存 68
第二章 綜合性實驗 74
實驗2-1 馬鈴薯試管微型薯的誘導(dǎo) 74
實驗2-2 植物胚培養(yǎng)技術(shù) 78
實驗2-3 植物花藥培養(yǎng)與單倍體的誘導(dǎo) 85
實驗2-4 植物小孢子的培養(yǎng) 91
實驗2-5 植物體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)與人工種子的制備 96
實驗2-6 植物原生質(zhì)體的分離、純化與融合 105
實驗2-7 植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)有用次生代謝物 114
實驗2-8 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化 119
實驗2-9 發(fā)狀根的誘導(dǎo)培養(yǎng)與次生代謝物的生產(chǎn) 124
實驗2-10 外源基因在植物原生質(zhì)體中的瞬時表達(dá) 128
第三章 設(shè)計性實驗 132
實驗3-1 植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對植物離體器官形態(tài)建成的影響 132
實驗3-2 植物的脫毒培養(yǎng)與離體快繁技術(shù)應(yīng)用 133
實驗3-3 植物體細(xì)胞無性系誘導(dǎo)與突變體篩選 134
第二篇 動物細(xì)胞工程實驗技術(shù)
第四章 動物細(xì)胞培養(yǎng)基本技術(shù) 142
實驗4-1 動物細(xì)胞培養(yǎng)所需器皿和器械的準(zhǔn)備 142
實驗4-2 動物細(xì)胞培養(yǎng)液的制備 146
實驗4-3 動物細(xì)胞的原代培養(yǎng) 148
實驗4-4 動物細(xì)胞的傳代培養(yǎng) 153
實驗4-5 細(xì)胞冷凍保存技術(shù) 155
實驗4-6 冷凍細(xì)胞復(fù)蘇及活力測定 157
實驗4-7 體外培養(yǎng)細(xì)胞生長曲線的測定 161
第五章 雜交瘤與單克隆抗體制備技術(shù) 165
實驗5-1 小鼠免疫脾細(xì)胞的制備 165
實驗5-2 骨髓瘤細(xì)胞的制備 169
實驗5-3 飼養(yǎng)層細(xì)胞的制備 170
實驗5-4 動物細(xì)胞融合和雜交瘤細(xì)胞篩選 172
實驗5-5 特異性單克隆抗體的檢測 174
實驗5-6 雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng) 178
實驗5-7 單克隆抗體的制備與分離、純化 180
主要參考文獻(xiàn) 185
附錄 細(xì)胞工程實驗室規(guī)則 188