《生物化學實驗》(第三版)增加了一些新的現代生化的分析和測試法,如遠紅外測定法;動態(tài)光散射法;透射電鏡法;原子力顯微鏡法等新內容。去掉不實用且陳舊的實驗,增加一些目前常用和實用的實驗,如增加比較簡單實用的 “殘余法對粗脂肪含量的測定”“植物葉片在衰老過程中過氧化脂質含量的變化”“淀粉酶活力測定”等實驗。集基礎性與經典性、理論與實際相結合,融知識傳播、能力培養(yǎng)及素質教育為一體。
本教材適合于生物工程、制藥工程、藥學院制藥和食品工程本科專業(yè)教學使用,也可供生物工程相關專業(yè)研究人員參考。
董曉燕,1962年生,博士,天津大學教授,著有《生物化學》獲2011年教育部普通高等教育精品教材;《生物化學實驗》(工科類專業(yè)適用)進入2014年教育部啟動的國家精品資源共享課集成創(chuàng)新項目(iCourse)。
第一章生物化學實驗的基本要求/001
第一節(jié)實驗的準確性/001
一、系統(tǒng)誤差/001
二、偶然誤差/002
三、過失錯誤/002
第二節(jié)實驗記錄及報告/002
一、實驗記錄/003
二、實驗報告/003
第三節(jié)實驗樣品的制備/004
一、動物臟器/004
二、微生物/004
三、細胞/004
第二章常見的實驗方法及基本原理/006
第一節(jié)透析/006
第二節(jié)沉淀/007
一、蛋白質的特性/007
二、常用的蛋白質沉淀方法/008
第三節(jié)色譜/010
一、色譜原理/010
二、幾種常見的色譜法/011
第四節(jié)電泳/017
一、電泳法的基本原理/018
二、幾種常用電泳法簡介/019
第五節(jié)分光光度法/021
一、基本原理/022
二、比色法/022
三、分光光度法/023
四、濁度法/024
第六節(jié)離心/024
第七節(jié)現代生化新方法/026
一、熒光分光光度法/026
二、旋光色散與圓二色性法/031
三、核磁共振波譜法/034
四、紅外光譜法/040
五、動態(tài)光散射法/042
六、透射電鏡法/044
七、原子力顯微鏡法/045
八、石英微晶天平/047
第三章普通實驗/050
實驗一實驗的基本操作及要求/050
一、玻璃儀器的洗滌及各種洗液的配制方法/050
二、攪拌和振蕩/051
三、容量玻璃器皿的使用方法/052
四、思考題/053
實驗二糖的顏色反應/054
一、莫氏實驗/054
二、塞氏實驗/055
三、杜氏(Tollen)試驗/055
四、思考題/056
實驗三3,5-二硝基水楊酸(DNS)法測定還原糖/056
一、目的/056
二、原理/056
三、實驗器材/056
四、材料與試劑/057
五、操作方法/057
六、思考題/058
實驗四淀粉酶對殼聚糖降解過程的測定/058
一、目的/058
二、原理/059
三、實驗器材/059
四、材料與試劑/059
五、操作方法/059
六、思考題/060
實驗五殘余法對粗脂肪含量的測定/061
一、目的/061
二、原理/061
三、實驗器材/061
四、材料與試劑/061
五、操作方法/061
六、結果與分析/062
七、注意事項/062
八、思考題/062
實驗六植物葉片在衰老過程中過氧化脂質含量的變化/062
一、目的/062
二、原理/063
三、實驗器材/063
四、材料與試劑/063
五、操作方法/063
六、結果計算/063
七、思考題/064
實驗七氨基酸的分離鑒定——紙色譜法/064
一、目的/064
二、原理/064
三、器材/064
四、試劑/064
五、操作方法/065
六、思考題/065
實驗八離子交換色譜法分離氨基酸/066
一、目的/066
二、原理/066
三、實驗器材/066
四、材料與試劑/066
五、操作方法/066
六、注意事項/067
七、思考題/068
實驗九蛋白質性質(一)——蛋白質及氨基酸的呈色反應/068
一、目的/068
二、呈色反應/068
三、思考題/073
實驗十蛋白質性質(二)——蛋白質等電點的測定和沉淀反應/073
一、蛋白質等電點的測定/073
二、蛋白質的沉淀及變性/075
三、尿蛋白定性檢驗/076
四、思考題/077
實驗十一蛋白質的制備——牛奶中提取酪蛋白/077
一、目的/077
二、原理/078
三、器材/078
四、材料與試劑/078
五、操作方法/078
六、思考題/079
實驗十二Bradford法測定蛋白質含量/079
一、目的/079
二、原理/079
三、器材/079
四、材料與試劑/080
五、操作方法/080
六、思考題/080
實驗十三紫外分光光度法測定蛋白質的含量/080
一、目的/080
二、原理/081
三、實驗器材/081
四、材料與試劑/081
五、操作方法/081
六、思考題/081
實驗十四ANS熒光分析法測定蛋白質的外源熒光/082
一、目的/082
二、原理/082
三、實驗器材/082
四、材料與試劑/082
五、操作方法/082
六、結果與分析/083
七、注意事項/083
八、思考題/084
實驗十五血清蛋白的醋酸纖維素薄膜電泳/084
一、目的/084
二、原理/084
三、器材/084
四、材料與試劑/085
五、操作方法/085
六、思考題/086
實驗十六多酚氧化酶的制備、化學性質及影響酶活的各種因素/086
一、目的/086
二、原理/087
三、實驗器材/087
四、材料和試劑/087
五、操作方法/088
六、思考題/089
實驗十七淀粉酶活力測定/089
一、目的/089
二、原理/090
三、實驗器材/090
四、材料與試劑/090
五、操作方法/090
六、結果與分析/091
七、注意事項/091
八、思考題/091
實驗十八根據底物濃度和酶反應速度之間的關系求米氏常數Km/091
一、目的/091
二、原理/091
三、實驗器材/093
四、材料與試劑/093
五、操作方法/093
六、思考題/095
實驗十九小牛胸腺DNA的制備及熔解溫度的測定/095
一、目的/095
二、原理/095
三、實驗器材/096
四、材料與試劑/096
五、操作方法/096
六、結果與分析/097
七、注意事項/097
八、思考題/097
實驗二十DNA的瓊脂糖凝膠電泳/097
一、目的/097
二、原理/097
三、器材/098
四、材料及試劑/098
五、操作方法/098
六、思考題/099
實驗二十一質粒DNA的小量制備/099
一、目的/099
二、原理/099
三、實驗器材/100
四、試劑及材料/100
五、操作方法/100
六、思考題/101
實驗二十二酵母RNA提取與定性和定量鑒定/101
一、目的/101
二、原理/101
三、實驗器材/102
四、材料與試劑/102
五、操作方法/102
六、思考題/103
實驗二十三轉氨基作用/104
一、目的/104
二、原理/104
三、實驗器材/104
四、材料與試劑/104
五、操作方法/105
六、思考題/106
第四章綜合實驗/107
實驗一SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳及蛋白質印跡/107
一、目的/107
二、原理/107
三、器材/108
四、材料與試劑/108
五、操作方法/109
六、思考題/112
實驗二PCR擴增目的基因片段/112
一、目的/112
二、原理/112
三、器材/113
四、材料與試劑/113
五、操作方法/113
六、思考題/114
實驗三質粒DNA的酶切及連接/114
一、目的/114
二、原理/114
三、實驗器材/114
四、材料與試劑/115
五、操作方法/115
六、思考題/116
實驗四重組DNA質粒的轉化/116
一、目的/116
二、原理/116
三、器材/117
四、材料與試劑/117
五、操作方法/117
六、思考題/118
實驗五枯草芽孢桿菌堿性磷酸酶的制備及酶活力的測定/118
一、目的/118
二、原理/118
三、實驗器材/119
四、材料和試劑/119
五、操作方法/119
六、思考題/121
實驗六雞卵黏蛋白的制備及活力的測定/121
一、目的/121
二、原理/121
三、實驗器材/122
四、材料和試劑/122
五、操作方法/122
六、思考題/125
附錄/126
一、實驗室規(guī)則和安全防護/126
二、常用儀器的使用/128
三、緩沖溶液/136
四、常用的硫酸銨飽和度計算表/140
五、色譜法常用數據及性質/141
六、分子生物學及基因工程常用試劑及數據/145
七、一些常用單位/153
參考文獻/155