巴西橡膠樹排膠理論基礎(chǔ)和分析技術(shù)指南
定 價(jià):65 元
- 作者: 王立豐,代龍軍,楊洪 編
- 出版時(shí)間:2021/10/1
- ISBN:9787511655172
- 出 版 社:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社
- 中圖法分類:S794.1
- 頁碼:245
- 紙張:
- 版次:1
- 開本:16開
本書介紹了天然橡膠生物合成機(jī)制、排膠過程活性氧產(chǎn)生和清除、橡膠樹轉(zhuǎn)錄調(diào)控等方面的研究進(jìn)展。并就如下技術(shù)在橡膠樹排膠機(jī)制研究中的應(yīng)用進(jìn)行詳細(xì)的指導(dǎo):植物轉(zhuǎn)錄因子分析,橡膠樹基因克隆、生物信息學(xué)分析和表達(dá)分析,橡膠樹膠乳酵母單、雙雜交cDNA文庫構(gòu)建,轉(zhuǎn)錄因子抗體制備和檢測,轉(zhuǎn)錄因子Pulldown分析,ChiP-seq鑒定轉(zhuǎn)錄因子靶基因,采用酵母單雜交篩選調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子,BiFC檢測技術(shù)驗(yàn)證蛋白互作,轉(zhuǎn)基因技術(shù)驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄因子功能酵母雙雜交技術(shù)證明蛋白互作技術(shù),亞細(xì)胞定位技術(shù),橡膠樹樹皮線粒體提取及相關(guān)生理參數(shù)測定,橡膠樹樹皮蛋白質(zhì)樣品的制備及LC-MS分析,橡膠樹排膠差異品種的代謝組分析。本書可供以橡膠樹等熱帶、亞熱帶果樹為研究對(duì)象的科研院所和高?蒲腥藛T、教師和研究生參考。
王立豐,博士學(xué)位,研究員,中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院橡膠研究所排膠機(jī)理與調(diào)控課題組組長。長期從事橡膠樹生理與分子生物學(xué)機(jī)制研究。系中國熱帶作物學(xué)會(huì)天然橡膠專業(yè)委員會(huì)會(huì)員,華中農(nóng)業(yè)大學(xué)和海南大學(xué)碩士研究生導(dǎo)師.海南省拔尖人才。主持和參與國家自然科學(xué)基金、瀾湄項(xiàng)目、國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃等科研項(xiàng)目28項(xiàng)。研究方向?yàn)橄鹉z樹高產(chǎn)光合生理、抗旱和抗寒等抗逆生理及轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)分子機(jī)制,橡膠樹排膠技術(shù)研究與應(yīng)用。已經(jīng)發(fā)表論文65篇,其中SCI論文20篇,出版英文專著3部,授權(quán)國家發(fā)明專利5項(xiàng)。
上篇 排膠理論基礎(chǔ)
第一章 天然橡膠生物合成機(jī)制研究進(jìn)展
一、植物中異戊二烯合成路徑
二、橡膠粒子在天然橡膠合成中的作用
三、線粒體為橡膠烴合成和膠乳再生提供物質(zhì)和能量保障
四、天然橡膠合成機(jī)理研究重要進(jìn)展——橡膠轉(zhuǎn)移酶及其復(fù)合體
五、基于巴西橡膠樹橡膠粒子離體天然橡膠合成體系
六、人工橡膠粒子構(gòu)建取得重要進(jìn)展
七、展望
第二章 排膠過程活性氧產(chǎn)生和清除研究進(jìn)展
一、死皮引起橡膠樹樹皮結(jié)構(gòu)與蛋白組成變化
二、橡膠樹死皮發(fā)生相關(guān)假說
三、死皮防控技術(shù)
四、死皮誘導(dǎo)的水分和活性氧機(jī)制模型
五、展望
第三章 橡膠樹轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究進(jìn)展
一、轉(zhuǎn)錄調(diào)控的原理簡介
二、橡膠生物合成中的轉(zhuǎn)錄調(diào)控
三、植物MYB轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展
四、植物MYB44轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展
五、MYB44轉(zhuǎn)錄因子在橡膠樹抗逆研究中的展望
下篇 技術(shù)指南
第四章 轉(zhuǎn)錄因子分析方法及其在橡膠樹排膠機(jī)制研究中的應(yīng)用
一、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)與功能簡介
二、生物信息學(xué)分析
三、轉(zhuǎn)錄因子發(fā)現(xiàn)與鑒定方法
四、互作蛋白與DNA篩選鑒定
五、蛋白質(zhì)互作的研究方法
六、轉(zhuǎn)基因功能驗(yàn)證
七、轉(zhuǎn)錄調(diào)控技術(shù)在橡膠樹排膠功能研究中的展望
第五章 橡膠樹MYB轉(zhuǎn)錄因子克隆、生物信息學(xué)和表達(dá)分析
一、橡膠樹HbMYBs基因成員結(jié)構(gòu)分析
二、材料處理方法
三、實(shí)驗(yàn)方法
四、結(jié)果與分析
五、討論
第六章 橡膠樹膠乳均一化酵母雙雜交cDNA文庫構(gòu)建
一、材料與方法
二、結(jié)果與分析
三、討論
第七章 抗體制備檢測與Western檢測
一、HblMYC3研究背景
二、橡膠樹HbIMYC3多克隆抗體制備和檢測
三、Western蛋白檢測
第八章 ABA信號(hào)途徑bZIP轉(zhuǎn)錄因子的Pull-down分析
一、ABA的抗逆功能
二、GST Pull-down證明體內(nèi)蛋白互作
第九章 ChiP-seq鑒定轉(zhuǎn)錄因子目標(biāo)基因
一、橡膠樹光照樣品的處理
二、ChIP免疫沉淀實(shí)驗(yàn)
三、ChIP文庫構(gòu)建流程
四、信息分析流程
五、數(shù)據(jù)過濾質(zhì)控
六、與參考序列比對(duì)
七、Peak分析
八、Peak注釋
第十章 轉(zhuǎn)錄因子蛋白互作分析方法
一、HbSRPP1基因克隆與分析檢測
二、HbSRPPI菌落PCR檢測和陽性克隆鑒定
三、酵母表達(dá)載體構(gòu)建
四、天然橡膠合成關(guān)鍵酶酵母表達(dá)載體構(gòu)建
五、基于酵母雙雜交驗(yàn)證橡膠生物合成關(guān)鍵酶互作
六、BiFC技術(shù)驗(yàn)證蛋白互作
七、螢火素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證蛋白互作
第十一章 轉(zhuǎn)基因擬南芥技術(shù)驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄因子功能
一、遺傳轉(zhuǎn)化擬南芥驗(yàn)證基因功能
二、HbMYB44轉(zhuǎn)基因擬南芥的功能驗(yàn)證
第十二章 轉(zhuǎn)錄因子亞細(xì)胞定位分析
一、融合表達(dá)載體構(gòu)建
二、HbMYB44亞細(xì)胞定位
第十三章 橡膠樹樹皮線粒體提取及相關(guān)生理參數(shù)測定
一、橡膠樹線粒體提取及純化
二、線粒體活性相關(guān)生理參數(shù)測定
三、橡膠樹樹皮電鏡樣品制備與超微結(jié)構(gòu)觀察
第十四章 橡膠樹樹皮及膠乳中亞細(xì)胞組分蛋白質(zhì)的提取及LC-MS分析
一、蛋白提取方法
二、蛋白質(zhì)的胰蛋白酶水解
三、用于質(zhì)譜數(shù)據(jù)檢索的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫的準(zhǔn)備及其他數(shù)據(jù)處理
四、蛋白質(zhì)的免疫學(xué)驗(yàn)證
第十五章 橡膠樹膠乳代謝組分析
一、橡膠樹材料處理
二、膠乳c乳清樣品制備
三、數(shù)據(jù)分析
四、差異代謝物的篩選
五、差異代謝物分析
參考文獻(xiàn)
附錄1 載體和菌株
附錄2 生化試劑及實(shí)驗(yàn)儀器
附錄3 培養(yǎng)基配制
附錄4 試劑配制及物品準(zhǔn)備
附錄5 縮略語
項(xiàng)目資助