目錄
第一章 生物化學(xué)與分子生物學(xué)實驗基礎(chǔ) 1
第一節(jié) 實驗室規(guī)章制度 1
第二節(jié) 實驗室的基本組成及使用 4
第二章 常用生物化學(xué)與分子生物學(xué)實驗技術(shù) 9
第一節(jié) 生物大分子的制備 9
第二節(jié) 層析技術(shù) 19
第三節(jié) 電泳技術(shù) 32
第四節(jié) 離心技術(shù) 38
第五節(jié) 分光光度技術(shù) 40
第六節(jié) PCR技術(shù) 41
第七節(jié) 分子雜交和印跡技術(shù) 51
第八節(jié) 基因克隆技術(shù) 56
第九節(jié) 生物大分子相互作用技術(shù) 65
第十節(jié) 基因編輯技術(shù) 66
第十一節(jié) RNA干擾技術(shù) 75
第三章 生物化學(xué)與分子生物學(xué)基本實驗 79
實驗一 蛋白質(zhì)等電點測定 79
實驗二 血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳 80
實驗三 蛋白質(zhì)的定量分析 81
實驗四 蛋白質(zhì)的變性與沉淀反應(yīng) 86
實驗五 凝膠過濾層析法分離蛋白質(zhì)（血紅蛋白與魚精蛋白的分離） 88
實驗六 氨基酸的分離與鑒定——層析法 90
實驗七 組織核酸的提取 92
實驗八 核酸水解及組分鑒定 93
實驗九 核酸含量的測定 94
實驗十 維生素C的定量測定 96
實驗十一 胡蘿卜素的層析分離 97
實驗十二 酶的特異性 99
實驗十三 影響酶作用的因素 100
實驗十四 尿淀粉酶活性的測定（Winslow法） 102
實驗十五 米氏常數(shù)的測定 103
實驗十六 琥珀酸脫氫酶的作用及其抑制 105
實驗十七 飽食、饑餓對肝糖原含量的影響 106
實驗十八 腎上腺素、胰島素對血糖濃度的影響 107
實驗十九 運(yùn)動對尿中乳酸含量的影響 108
實驗二十 血漿脂蛋白電泳 109
實驗二十一 脂肪酸的β氧化 110
實驗二十二 血清總膽固醇測定 111
實驗二十三 乳酸脫氫酶及其輔酶的作用 112
實驗二十四 氰化物中毒機(jī)制及細(xì)胞色素c氧化酶的作用 114
實驗二十五 過氧化氫酶的定性反應(yīng) 115
實驗二十六 胃蛋白酶對蛋白質(zhì)的消化作用 115
實驗二十七 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（SGPT）活性測定 116
實驗二十八 氨基酸的生酮作用 118
實驗二十九 尿素的生成 119
實驗三十 血清尿素氮測定 120
實驗三十一 血液中非蛋白氮的測定 121
實驗三十二 血紅蛋白電泳 122
實驗三十三 血漿的緩沖作用 123
實驗三十四 血漿二氧化碳結(jié)合力的測定（滴定法） 124
實驗三十五 血清鈣的測定 125
實驗三十六 血清無機(jī)磷的測定 126
實驗三十七 動物肝DNA的提�。�濃鹽法） 127
實驗三十八 外周血基因組DNA的提取 128
實驗三十九 組織或細(xì)胞RNA的抽提 129
實驗四十 基因工程中重組DNA的構(gòu)建 129
實驗四十一 感受態(tài)細(xì)胞的制備和質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化 131
實驗四十二 質(zhì)粒DNA小量提取及酶切鑒定 132
實驗四十三 克隆化基因在大腸桿菌中的表達(dá) 134
實驗四十四 PCR擴(kuò)增和瓊脂糖電泳檢測 135
實驗四十五 蛋白質(zhì)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 138
第四章 生物化學(xué)與分子生物學(xué)綜合性實驗 142
實驗一 多糖的分離純化、分子修飾及生物活性的研究 142
實驗二 蘆薈多糖的提取及其抗氧化性的研究 144
實驗三 免疫共沉淀證明 E-cadherin 與 p120-catenin 的相互作用 146
實驗四 GST pull-down驗證FRMD5與intergrinβ1的相互作用 147
實驗五 ChIP 實驗證實c-myc對cyclinD1的轉(zhuǎn)錄調(diào)控 149
實驗六 siRNA靶向敲低EGFR的表達(dá) 151
實驗七 CRISPR/Cas9敲除細(xì)胞NEDD1表達(dá) 153
實驗八 蛋白質(zhì)印跡分析 156
附錄1 試劑配制法 161
附錄2 試劑配制注意事項 165
附錄3 實驗室常用數(shù)據(jù)參考表 173
參考文獻(xiàn) 178