《三支決策與粒計算》是《21世紀(jì)生物技術(shù)系列》的一個分冊,分上、下篇,共13章。上篇主要介紹PCR基礎(chǔ)理論和技術(shù)操作知識,以及技術(shù)操作中可能遇到的各種問題的解決方法。下篇介紹PCR相關(guān)技術(shù)的應(yīng)用,包括PCR技術(shù)在構(gòu)建cDNA文庫、測序及基因突變檢測,性別鑒定,動植物、微生物DNA分型研究中的應(yīng)用;PCR技術(shù)分析DNA序列多態(tài)性、VNTR和STR;PCR技術(shù)檢測CDK4敲入轉(zhuǎn)基因鼠的基因型;PCR體系中模板DNA濃度與PCR擴增效率的關(guān)系。
《三支決策與粒計算》可供生物醫(yī)學(xué)專業(yè)研究生、本科生及從事分子生物學(xué)研究的科研人員閱讀和實驗時參考。
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目錄
上篇 PCR的基本理論與技術(shù)
第一章 常規(guī)PCR技術(shù)的原理與方法 (1)
第一節(jié) PCR技術(shù)的發(fā)展簡史 (1)
第二節(jié) PCR技術(shù)的基本原理 (2)
第三節(jié) PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件 (5)
第四節(jié) PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件的優(yōu)化 (12)
第五節(jié) PCR反應(yīng)的保真性 (19)
第六節(jié) PCR常見問題及對策 (20)
第二章 PCR模板制備 (23)
第一節(jié) 基因組DNA提取技術(shù) (23)
第二節(jié) RNA提取技術(shù)與cDNA模板的制備 (27)
第三章 PCR擴增產(chǎn)物處理與PCR實驗室 (32)
第一節(jié) PCR擴增產(chǎn)物分析與處理 (32)
第二節(jié) PCR產(chǎn)物的純化 (38)
第三節(jié) PCR污染與對策 (38)
第四節(jié) PCR技術(shù)實驗室 (40)
第四章 定量PCR技術(shù) (42)
第一節(jié) 定量PCR的基本概念與基本原理 (42)
第二節(jié) 實時熒光定量PCR (46)
第五章 原位PCR相關(guān)技術(shù) (59)
第一節(jié) 原位PCR (59)
第二節(jié) 原位PCR的分類 (66)
第三節(jié) 原位PCR技術(shù)流程 (68)
第六章 其他PCR相關(guān)技術(shù)進展 (94)
第一節(jié) 反向PCR技術(shù) (94)
第二節(jié) 巢式PCR (95)
第三節(jié) 多重PCR (97)
第四節(jié) 串聯(lián)重復(fù)序列的PCR擴增 (99)
第五節(jié) RAPD技術(shù) (101)
下篇 PCR相關(guān)技術(shù)的應(yīng)用
第七章 PCR技術(shù)在構(gòu)建cDNA文庫、測序及基因突變檢測中的應(yīng)用 (105)
第一節(jié) PCR在cDNA文庫構(gòu)建中的應(yīng)用 (105)
第二節(jié) PCR在DNA測序中的應(yīng)用 (112)
第三節(jié) PCR技術(shù)在基因突變檢測中的應(yīng)用 (114)
第八章 PCR技術(shù)分析DNA序列多態(tài)性 (117)
第一節(jié) DNA的兩種多態(tài)性和遺傳標(biāo)記分類 (117)
第二節(jié) PCR技術(shù)分析DNA序列多態(tài)性 (118)
第九章 PCR技術(shù)分析VNTR和STR (125)
第一節(jié) 概述 (125)
第二節(jié) 擴增片段長度多態(tài)性分析分型技術(shù)基本原理 (126)
第三節(jié) 用PCR技術(shù)分析小衛(wèi)星VNTR基因座分型的基本技術(shù) (126)
第四節(jié) 用PCR技術(shù)分析微衛(wèi)星(STR)基因座 (138)
第十章 PCR技術(shù)在性別鑒定中的應(yīng)用 (150)
第一節(jié) 概述 (150)
第二節(jié) PCR擴增的基本方法 (150)
第三節(jié) 討論 (152)
第十一章 PCR技術(shù)在動植物、微生物DNA分型研究中的應(yīng)用 (153)
第一節(jié) 概述 (153)
第二節(jié) 實驗方法與步驟 (156)
第三節(jié) 結(jié)果與討論 (160)
第十二章 PCR技術(shù)檢測CDK4敲入轉(zhuǎn)基因鼠的基因型 (162)
第一節(jié) 實驗原理 (162)
第二節(jié) 實驗方法 (162)
第三節(jié) 實驗結(jié)果 (164)
第四節(jié) 結(jié)果分析及注意事項 (169)
第十三章 PCR體系中模板DNA濃度與PCR擴增效率的關(guān)系 (171)
第一節(jié) 實驗?zāi)康?(171)
第二節(jié) 實驗方法 (171)
第三節(jié) 實驗結(jié)果 (173)
第四節(jié) 結(jié)果分析 (176)