生物檢測(cè)是近年來高速發(fā)展的學(xué)科之一!渡餀z測(cè)技術(shù)》(作者陳朝銀、趙聲蘭)以現(xiàn)代生物工程技術(shù)為主線,系統(tǒng)介紹了生物過程及其生物產(chǎn)品的理化性質(zhì)、功效與代謝等分析檢測(cè)的原理、技術(shù)、手段、方法、應(yīng)用及發(fā)展。主要內(nèi)容包括基因及基因組學(xué)、蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)組學(xué)、次生活性成分、酶、細(xì)胞、功效與代謝、生物安全性評(píng)價(jià)等的分析檢測(cè)技術(shù),以及生物傳感器及生物芯片技術(shù)。內(nèi)容系統(tǒng)、新穎,具有較強(qiáng)的集成性和實(shí)用性!渡餀z測(cè)技術(shù)》可作為綜合性院校、農(nóng)林院校、師范院校、醫(yī)學(xué)院校等相關(guān)專業(yè)的本科生、研究生的教材和教學(xué)參考書,也可作為相關(guān)科研和教學(xué)工作者的參考用書。
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目錄
前言
第1章 基因及基因組學(xué)檢測(cè)技術(shù) 1
1.1 核酸制品的理化指標(biāo)及其檢測(cè) 1
1.1.1 核酸分離純化的原則 1
1.1.2 核酸分離純化的技術(shù)路線 2
1.1.3 基因組DNA的分離與純化 3
1.1.4 質(zhì)粒DNA的分離與純化 4
1.1.5 RNA的分離與純化 4
1.1.6 全白動(dòng)核酸提取純化工作站 5
1.2 DNA的變性與復(fù)性及其Tm值和Cot值測(cè)定 6
1.2.1 DNA變性及其Tm值的意義與測(cè)定 6
1.2.2 DNA復(fù)性及其Cot值的意義和測(cè)定 7
1.2.3 核酸雜交分析及核酸探針技術(shù) 8
1.3 常規(guī)PCR原理與步驟 9
1.3.1 PCR的基本原理 9
1.3.2 操作過程 9
1.3.3 熱穩(wěn)定性DNA聚合酶 10
1.3.4 PCR引物的設(shè)計(jì) 10
1.3.5 PCR擴(kuò)增的模板 10
1.3.6 常規(guī)的PCR擴(kuò)增方案 10
1.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù) 11
1.4.1 CT值 12
1.4.2 熒光信號(hào)和定量數(shù)據(jù)的歸一化 14
1.4.3 污染的預(yù)防和熱啟動(dòng) 14
1.4.4 標(biāo)準(zhǔn) 14
1.4.5 TaqMan探針技術(shù)原理 15
1.4.6 SYBR Green I熒光染料 15
1.4.7 定量PCR儀 16
1.5 其他非常規(guī)擴(kuò)增技術(shù) 16
1.6 核酸的序列測(cè)定技術(shù) 18
1.6.1 雙脫氧末端終止法測(cè)序 18
1.6.2 全自動(dòng)測(cè)序 20
1.6.3 測(cè)序策略 21
1.6.4 高通量測(cè)序 22
1.7 基因組學(xué)檢測(cè)技術(shù) 24
1.7.1 結(jié)構(gòu)基因組學(xué)檢測(cè)技術(shù) 24
1.7.2 功能基因組學(xué)檢測(cè)技術(shù) 25
1.7.3 比較基因組學(xué)檢測(cè)技術(shù) 26
1.7.4 宏基因組學(xué)檢測(cè)技術(shù) 26
主要參考文獻(xiàn) 27
第2章 蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)技術(shù) 28
2.1 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì) 29
2.2 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定 31
2.2.1 水解分析 31
2.2.2 蛋白質(zhì)分子中末端氨基酸的分析 32
2.2.3 質(zhì)譜測(cè)序 34
2.2.4 蛋白質(zhì)的非共價(jià)復(fù)合物研究 35
2.3 蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)分析測(cè)定 35
2.3.1 儀器分析方法 35
2.3.2 理論分析方法 37
2.4 蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)技術(shù) 46
2.4.1 電泳分析法 47
2.4.2 層析技術(shù) 47
2.4.3 質(zhì)譜技術(shù) 48
2.4.4 蛋白質(zhì)修飾及其分析方法 52
主要參考文獻(xiàn) 55
第3章 酶檢測(cè)技術(shù) 56
3.1 基礎(chǔ)酶學(xué)檢測(cè)技術(shù) 56
3.1.1 酶反應(yīng)的解析 56
3.1.2 酶學(xué)常數(shù)測(cè)定 57
3.2 應(yīng)用酶學(xué)檢測(cè)技術(shù) 66
3.2.1 酶產(chǎn)品質(zhì)檢 66
3.2.2 酶法檢測(cè) 79
3.2.3 常見酶活力測(cè)定方法 85
主要參考文獻(xiàn) 103
第4章 次生活性成分檢測(cè)技術(shù) 104
4.1 生物堿 104
4.1.1 生物堿的分類 104
4.1.2 生物堿的理化性質(zhì) 105
4.1.3 生物堿的提取分離 106
4.1.4 生物堿定性鑒別 109
4.1.5 生物堿的含量測(cè)定 111
4.2 醌類化合物 114
4.2.1 醌類化合物的主要理化特性 115
4.2.2 醌類化合物的提取分離 116
4.2.3 醌類化合物的定性鑒別 117
4.2.4 醌類化合物的含量測(cè)定 119
4.2.5 蒽醌類化合物的結(jié)構(gòu)測(cè)定 120
4.3 黃酮類化合物 123
4.3.1 黃酮類化合物的主要理化特性 123
4.3.2 黃酮類化合物的分離 123
4.3.3 黃酮類化合物的定性鑒別 125
4.3.4 黃酮類化合物的定量分析 127
4.4 香豆素和木脂素類 130
4.4.1 香豆素類成分的主要理化性質(zhì) 130
4.4.2 香豆素類的提取分離 131
4.4.3 香豆素類的檢識(shí) 132
4.4.4 木脂素類的理化性質(zhì) 132
4.4.5 木脂素類的提取分離 132
4.4.6 木脂素類的檢識(shí) 133
4.5 皂苷類 133
4.5.1 皂苷的性質(zhì) 133
4.5.2 皂苷的提取分離 134
4.5.3 皂苷類成分的定性分析 135
4.5.4 皂苷類成分的定量分析 136
4.6 強(qiáng)心苷類 137
4.6.1 強(qiáng)心苷類的主要性質(zhì) 137
4.6.2 強(qiáng)心苷類的檢識(shí)反應(yīng) 139
4.6.3 強(qiáng)心苷類的提取分離 140
4.7 揮發(fā)油 141
4.7.1 揮發(fā)油的主要性質(zhì) 141
4.7.2 揮發(fā)油成分的提取 141
4.7.3 揮發(fā)油成分的分離 142
4.7.4 揮發(fā)油的鑒定 M3
4.8 抗生素 143
4.8.1 抗生素的種類 143
4.8.2 抗生素的效價(jià)測(cè)定 144
主要參考文獻(xiàn) 147
第5章 細(xì)胞分析檢測(cè)技術(shù) 148
5.1 細(xì)胞的分離與培養(yǎng) 148
5.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的特點(diǎn)與應(yīng)用 148
5.1.2 培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的條件 149
5.1.3 原代培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離 150
5.2 細(xì)胞形態(tài)與活性的常規(guī)檢測(cè)法 151
5.2.1 普通顯微染色觀察法 151
5.2.2 MTT法 153
5.3 數(shù)字顯微及激光共聚焦顯微分析法 155
5.3.1 數(shù)字顯微分析法 155
5.3.2 激光掃描共聚焦顯微觀察分析法 155
5.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)技術(shù) 158
5.4.1 流式細(xì)胞術(shù)的發(fā)展簡(jiǎn)史 158
5.4.2 流式細(xì)胞術(shù)的基本結(jié)構(gòu)和工作原理 159
5.4.3 流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用 165
主要參考文獻(xiàn) 168
第6章 功效與代謝檢測(cè)技術(shù) 169
6.1 保健食品功效檢測(cè)與評(píng)價(jià) 169
6.1.1 保健食品概述 169
6.1.2 保健食品功能檢測(cè) 171
6.2 藥理檢測(cè)技術(shù) 183
6.2.1 藥效學(xué)檢測(cè)技術(shù) 183
6.2.2 藥物代謝動(dòng)力學(xué)檢測(cè)技術(shù) 191
主要參考文獻(xiàn) 198
第7章 生物安全評(píng)價(jià)方法與技術(shù) 199
7.1 生物安全性評(píng)價(jià)基本方法 199
7.1.1 急性毒性試驗(yàn) 199
7.1.2 蓄積毒性試驗(yàn) 199
7.1.3 亞急性毒性試驗(yàn) 200
7.1.4 慢性毒性試驗(yàn) 201
7.1.5 致癌試驗(yàn) 203
7.1.6 致突變?cè)囼?yàn) 204
7.1.7 代謝試驗(yàn) 205
7.2 各主要制品生物安全性評(píng)價(jià) 205
7.2.1 食品安全性評(píng)價(jià) 205
7.2.2 藥物毒理及安全性評(píng)價(jià) 207
7.2.3 化妝品毒理及安全性評(píng)價(jià) 212
7.2.4 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性評(píng)價(jià) 222
7.3 質(zhì)量安全認(rèn)證 223
7.3.1 HACCP認(rèn)證 223
7.3.2 GMP認(rèn)證 224
7.3.3 QS認(rèn)證 226
7.3.4 其他與生物技術(shù)產(chǎn)品相關(guān)的認(rèn)證 228
主要參考文獻(xiàn) 228
第8章 生物傳感器及生物芯片技術(shù) 229
8.1 生物傳感器 229
8.1.1 生物傳感器的結(jié)構(gòu)和原理 230
8.1.2 生物傳感器的定義與分類 230
8.1.3 幾種主要的生物傳感器 230
8.2 生物芯片 237
8.2.1 生物芯片的制造 238
8.2.2 生物芯片的使用和閱讀 241
8.2.3 各種生物芯片 244
8.2.4 生物芯片的應(yīng)用 247
主要參考文獻(xiàn) 249