《人體基本形態(tài)與結(jié)構(gòu)/普通高等教育“十二五”規(guī)劃教材，護(hù)理學(xué)專業(yè)器官系統(tǒng)教學(xué)創(chuàng)新教材》：
　　第一篇 組織學(xué)
　　第1章 組織學(xué)緒論
　　一、組織學(xué)的研究內(nèi)容和意義
　　組織學(xué)histology是應(yīng)用多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)和染色方法及各型顯微鏡，對(duì)機(jī)體細(xì)胞、組織和器 官的微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能進(jìn)行深入研究的科學(xué)，它以顯微鏡觀察組織切片為基本方法， 故又稱顯微解剖學(xué)microanatomy。所謂的微細(xì)結(jié)構(gòu)主要指光鏡結(jié)構(gòu)和電鏡結(jié)構(gòu)electron mi?croscopic structure。光鏡結(jié)構(gòu)是指在光學(xué)顯微鏡下能分辨的一般結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核、核 仁等，其度量單位是微米。電鏡結(jié)構(gòu)又稱超微結(jié)構(gòu)ultrastructure，是 指在電子顯微鏡下能觀察到的微細(xì)結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器及其大分子物質(zhì)，其度量單位 是納米（nm）。
　　近年來，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，組織學(xué)研究方法在經(jīng)典技術(shù)的基礎(chǔ)上取得了巨大進(jìn)展， 不僅對(duì)細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)及其與功能之間關(guān)系的觀察更加精細(xì)和深入，而且對(duì)細(xì)胞在功能活 動(dòng)中各種酶活性和各種物質(zhì)的含量變化，也能夠進(jìn)行精確的定性、定位和定量。現(xiàn)代組織 學(xué)涉及的研究領(lǐng)域十分廣闊，處于當(dāng)代生命科學(xué)各學(xué)科相互交叉的網(wǎng)絡(luò)中，從整體水平、細(xì) 胞水平和分子水平探索許多復(fù)雜生命現(xiàn)象的物質(zhì)基礎(chǔ)及環(huán)境與生物體的相互關(guān)系，與現(xiàn)代 生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的很多重大理論進(jìn)展、人類社會(huì)面臨的許多實(shí)際問題和疾病防治密切相關(guān)。 學(xué)習(xí)醫(yī)學(xué)科學(xué)首先必須熟悉人體的結(jié)構(gòu)、組成及其基本生命現(xiàn)象，而組織學(xué)是醫(yī)學(xué)教育的 重要入門課程，它為生理學(xué)、病理學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)等的學(xué)習(xí)奠定堅(jiān)實(shí)的 基礎(chǔ)。
　　二、組織學(xué)研究方法
　　組織學(xué)的研究方法很多，其中顯微鏡技術(shù)是最基本和最常用的技術(shù)。其他如組織細(xì)胞 化學(xué)技術(shù)、免疫組織細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、放射自顯影技術(shù)、原位雜交技術(shù)及激光掃描共聚焦顯微 鏡技術(shù)等細(xì)胞和分子標(biāo)記技術(shù)，可用于動(dòng)態(tài)觀察生命物質(zhì)在組織和細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生、分布及其 運(yùn)行規(guī)律。為了觀察細(xì)胞生活狀態(tài)，產(chǎn)生了各種細(xì)胞、組織器官培養(yǎng)技術(shù)及顯微操作、細(xì)胞 分離等技術(shù)。此外隨著組織學(xué)的迅猛發(fā)展，其他相關(guān)學(xué)科特別是細(xì)胞分子生物學(xué)的研究方 法和手段亦大量應(yīng)用于組織學(xué)的研究。這里就組織學(xué)最基本和常用的研究方法進(jìn)行簡單 介紹。
　　f （-）光學(xué)顯微鏡技術(shù)
　　光學(xué)顯微鏡包括普通光學(xué)顯微鏡、突光顯微鏡fluorescence microscope、相差顯微鏡 phase contrast microscope、暗視野顯微鏡dark-field microscope、激光掃描共聚焦顯微鏡 confocal laser scanning microscope（ CLSM）等，應(yīng)用普通光學(xué)顯微鏡（簡稱光鏡）觀察組織切片是組織學(xué)研究的最基本方法。光鏡的分辨率為0.2pm，放大倍數(shù)為1500倍左右。用光 鏡觀察組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)時(shí)，必須將組織樣品切成薄片進(jìn)行染色，即標(biāo)本制備。常用的標(biāo)本制 備方法為石蠟切片技術(shù)，即取動(dòng)物或人體的新鮮組織塊，經(jīng)固定fixation、脫水與石蠟包埋 embedding等程序處理，再用切片機(jī)microtome將固定后的組織塊（3?5mm3大�。┣谐�5? 10pm厚的組織切片tissue section，切片貼在載玻片上，經(jīng)脫蠟、染色、透明等步驟后，以封固 劑和蓋玻片封固，即可長期保存，鏡下觀察。除了石蠟切片技術(shù)外，還可采用其他不同的標(biāo) 本制作技術(shù)，如血液及其他液體可制成涂片smear；疏松結(jié)締組織和腸系膜等軟組織可撕成 薄片制成鋪片；牙和骨等堅(jiān)硬組織可制成磨片；為了保存酶、蛋白質(zhì)的生物活性，可制成冰 凍切片。
　　組織學(xué)中最常用的是蘇木精hematoxylin和伊紅eosin染色法，簡稱HE染色法（圖1-1， 彩圖1-1）。蘇木精為堿性染料，能使細(xì)胞核和胞質(zhì)內(nèi)的嗜堿性物質(zhì)著紫藍(lán)色，稱為嗜堿性 basophilia；伊紅為酸性染料，能使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞間質(zhì)內(nèi)的嗜酸性物質(zhì)著紅色，稱為嗜酸性ac- idophilia；對(duì)堿性和酸性染料親和力都不強(qiáng)的成分被染成淡紫紅色，稱為嗜中性neutrophilia。
　　除HE染色方法外，還有多種染色方 法能特異性顯示某些細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)，如用蘇 丹染料顯示脂肪組織，染料溶于脂肪內(nèi)， 使細(xì)胞內(nèi)的脂滴顯色；用醛復(fù)紅或地衣紅 染色能顯示組織內(nèi)的彈性纖維；有的細(xì)胞 經(jīng)重鉻酸鹽處理后呈棕褐色，稱為嗜鉻性 chromaffinity；有些結(jié)構(gòu)成分如肥大細(xì)胞 的細(xì)胞質(zhì)顆粒和軟骨基質(zhì)中的糖氨多糖， 當(dāng)用甲苯胺藍(lán)toluidine blue等減性染料 染色后呈紫紅色，這種現(xiàn)象稱為異染性 metachromasia；有的組織成分或細(xì)胞用硝
　　酸銀處理時(shí)，能使硝酸銀還原，形成棕黑色的銀微粒沉淀，此特性稱親銀性argentaffin ；有 的組織成分或細(xì)胞無直接還原作用，需加入還原劑方能形成銀微粒沉淀，則稱為嗜銀性
　　argyrophilia。
　�。ǘ�）電子顯微鏡技術(shù)
　　1.透射電鏡transmission electron microscope（TEM） 標(biāo)本制作也是經(jīng)過固定、包埋、切片、染色等步驟，但透射電鏡是以電子束為光源，穿透力低，而放大倍數(shù)為幾萬甚至幾十 萬倍，分辨率可達(dá)0. 2nm，故標(biāo)本制備的要求較光鏡更為嚴(yán)格，新鮮組織切成小塊（小于 1mm3），常用戊二醛和鋨酸雙重固定，樹脂包埋，以超薄切片機(jī)切成厚50?70nm的超薄切 片，經(jīng)乙酸鈾和檸檬酸鉛等重金屬電子染色后，置于電鏡下觀察。標(biāo)本在熒光屏上呈黑白 反差的結(jié)構(gòu)影像，被重金屬浸染呈黑色的結(jié)構(gòu)，稱電子密度高electmn-dense；反之，淺染的部 分稱電子密度低electron-lucent（圖1-2）。
　　2.掃描電鏡scanning electron microscope （SEM）是繼透射電鏡之后發(fā)展起來的，用 于觀察細(xì)胞和組織的表面結(jié)構(gòu)。樣品制備較簡單，組織固定后不需包埋與切片，置于真空 鍍膜儀內(nèi)干燥，在標(biāo)本表面先后噴鍍一層碳膜和合金膜，即可置于鏡下，熒光屏上電子掃描 顯影攝片。掃描電鏡的景深長，樣品表面的金屬膜可提高其導(dǎo)電性和圖像反差，呈現(xiàn)富有立體感的表面圖像，如細(xì)胞表面的微絨毛、纖毛及細(xì)胞的分泌或吞噬行為等（圖1-3）。
　　圖1-2成纖維細(xì)胞透射電鏡圖
　　圖1-3纖毛掃描電鏡圖
　　3.冷凍蝕刻復(fù)型術(shù)freeze etch replica是在透射電鏡下觀察組織或細(xì)胞斷裂面的金屬復(fù)制膜，顯示組織、細(xì)胞微細(xì)結(jié)構(gòu)的立體影像。組織塊經(jīng)甘油生理鹽水處理（防止形成冰 晶）后投人液氮快速凍結(jié)，在低溫下用鋼刀將樣品劈開形成凹凸不平的斷裂面，-1001真空 下使斷裂面的冰晶升華，暴露不平整表面，在斷裂面上先后噴鍍一層合金膜和碳膜，用次氯 酸鈉等將組織腐蝕掉；將反差的凸凹不平的金屬復(fù)型膜置于透射電鏡下觀察。此項(xiàng)技術(shù)尤 其適用于研究生物膜結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。
　�。ㄈ�）組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)術(shù)
　　組織化學(xué)histochemistry和細(xì)胞化學(xué)cytochemistry技術(shù)是通過化學(xué)或物理反應(yīng)原理顯 示組織切片細(xì)胞內(nèi)某種化學(xué)成分，進(jìn)行定位、定量及其與功能相關(guān)的研究�；�本原理是 在組織切片或細(xì)胞樣品上加一定試劑，該試劑與組織內(nèi)的某種成分起化學(xué)物理反應(yīng)，形 成有色終末產(chǎn)物，在光鏡下觀察，研究糖 類、脂類、蛋白質(zhì)、酶、核酸等物質(zhì)在組織或 細(xì)胞內(nèi)的分布；如用顯微分光光度計(jì)測(cè)定，則可進(jìn)行定量研究。有的標(biāo)本還可在電鏡 下觀察。例如，最常用于顯示組織、細(xì)胞內(nèi) 的多糖和糖蛋白的方法是過碘酸-雪夫反應(yīng) periodic acid Schiff reaction （ PAS）。標(biāo)本中 的糖類物質(zhì)被強(qiáng)氧化劑（過碘酸）氧化，形 成醛基，后者繼而與Schiff試劑（無色亞硫 酸品紅復(fù)合物）結(jié)合，形成紫紅色反應(yīng)產(chǎn)物，PAS反應(yīng)陽性部位即為多糖的存在部 位（圖1-4）。
　　三、組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法
　�。ㄒ唬┢矫媾c立體的關(guān)系
　　人體的結(jié)構(gòu)是三維立體的，而在鏡下觀察的組織切片所顯示的是細(xì)胞、組織和器官的 二維平面結(jié)構(gòu)。同一結(jié)構(gòu)如血管、腺體等管狀結(jié)構(gòu)，由于切面不同而呈現(xiàn)完全不同的平面 圖像。通過細(xì)胞、組織、器官平面結(jié)構(gòu)的觀察，必須在思維中對(duì)這些二維圖像進(jìn)行綜合歸 納，從而建立起三維的立體結(jié)構(gòu)。因此應(yīng)注意從平面結(jié)構(gòu)的觀察，樹立整體結(jié)構(gòu)的概念。
　�。ǘ�）結(jié)構(gòu)與功能相聯(lián)系
　　細(xì)胞、組織和器官均有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，結(jié)構(gòu)是行使一定功能的基礎(chǔ)，兩者密切聯(lián)系。如巨噬細(xì)胞有大量的溶酶體；蛋白質(zhì)分泌細(xì)胞含有豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基 復(fù)合體；肌纖維含有大量肌絲，是肌肉收縮和舒張的物質(zhì)基礎(chǔ)；上皮組織則細(xì)胞多且排列緊 密，具有吸收和保護(hù)等功能相關(guān)結(jié)構(gòu)。因此，結(jié)構(gòu)與功能相聯(lián)系既能達(dá)到深入理解，融會(huì)貫 通，又能抓住要點(diǎn)，掌握規(guī)律。
　　（三）靜態(tài)與動(dòng)態(tài)相聯(lián)系
　　人體的微細(xì)結(jié)構(gòu)在生活狀態(tài)下始終處于動(dòng)態(tài)變化中，由于標(biāo)本制備時(shí)間和功能狀態(tài)不 同，組織、細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)也不同。如甲狀腺濾泡及濾泡上皮隨著甲狀腺功能狀態(tài)不同而 形態(tài)不一；子宮內(nèi)膜的結(jié)構(gòu)隨著月經(jīng)周期不同，形態(tài)變化很大。在切片中所見的形象都是 某一時(shí)間點(diǎn)的靜態(tài)結(jié)構(gòu)，要善于從組織的靜態(tài)時(shí)相理解其動(dòng)態(tài)變化，分析其動(dòng)態(tài)過程。
　　（四）縱向與橫向的聯(lián)系
　　組織學(xué)許多內(nèi)容前后關(guān)聯(lián)，相互印證。如細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能是組織學(xué)的基礎(chǔ)，貫穿于全書始末；如細(xì)胞間連接結(jié)構(gòu)不僅存在于上皮細(xì)胞之間，而且可存在于其他組織的細(xì)胞之 間，并參與組織和器官的重要功能活動(dòng)；內(nèi)分泌細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等更是在人體生 命活動(dòng)的整體網(wǎng)絡(luò)中起廣泛而重要的作用。
　　總之，在組織學(xué)的學(xué)習(xí)中要端正態(tài)度、充分重視，分清主次、結(jié)構(gòu)為主，突出重點(diǎn)、掌握 全面，及時(shí)消化、循序漸進(jìn)，重視實(shí)驗(yàn)、鞏固理論，要善于自主學(xué)習(xí)、擴(kuò)充知識(shí)，縱橫聯(lián)系、深 化認(rèn)識(shí)，只有這樣才能為以后的各醫(yī)學(xué)學(xué)科的學(xué)習(xí)奠定堅(jiān)實(shí)寬厚的基礎(chǔ)，才能適應(yīng)新世紀(jì) 醫(yī)藥衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展的要求。
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　　第2章細(xì)胞
　　細(xì)胞是一切生物體形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理功能和生長發(fā)育的基本單位。成人人體約有16x 1014個(gè)細(xì)胞。雖然構(gòu)成人體的細(xì)胞大小不一、形態(tài)各異、功能不同，但是它們都有一個(gè)共同 特點(diǎn)，即細(xì)胞的結(jié)構(gòu)均由細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核三部分構(gòu)成（圖2-1）。
　　第1節(jié)細(xì)胞膜
　　細(xì)胞膜cell membrane是指細(xì)胞外表面的膜，又稱質(zhì)膜plasma membrane。細(xì)胞內(nèi)膜包括細(xì)胞器（線粒體、高爾基復(fù)合體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、溶酶體、微體）膜與核膜。質(zhì)膜與細(xì)胞內(nèi)膜統(tǒng)稱 為生物膜，下面以細(xì)胞膜為例講述其結(jié)構(gòu)與功能。
　　一、細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)
　　細(xì)胞膜在光鏡下難以分辨。在電鏡下可見平行的三層結(jié)構(gòu)，即電子密度高的內(nèi)、外兩 層與電子密度低的中間層，顯示出“兩暗夾一明”的圖像。
　　細(xì)胞膜的化學(xué)成分主要包括蛋白質(zhì)、
　　類脂和糖類。目前比較公認(rèn)的生物膜分 子結(jié)構(gòu)是“液態(tài)鑲嵌模型” fluid mosaic model：以液態(tài)的類脂雙分子層為基架，其 中鑲嵌著各種不同生理功能的球狀蛋白質(zhì)（圖2-2）。
　　類脂分子以磷脂為主，結(jié)構(gòu)分頭尾兩端，頭部為親水基團(tuán)，朝向膜的內(nèi)、外表面；尾部為 疏水基團(tuán)，朝向膜的中央，形成特有的類脂雙分子層結(jié)構(gòu)。在正常生理狀態(tài)下，類脂分子處 于液態(tài)，有一定的流動(dòng)性。膜蛋白membrane protein為鑲嵌于類脂雙分子層中的球狀蛋白 質(zhì)，根據(jù)膜蛋白與脂類分子結(jié)構(gòu)的位置關(guān)系，可分為內(nèi)在蛋白和外周蛋白兩類。內(nèi)在蛋白 又稱為跨膜蛋白，占70% ~ 80%，以不同深度鑲嵌于雙層類脂中；外周蛋白，又稱外在蛋白， 占20%?30%，附著于膜內(nèi)、外表面。糖類以寡糖鏈形式與細(xì)胞表面的類脂、膜蛋白結(jié)合，從 而形成糖脂或糖蛋白。有的細(xì)胞表面由于寡糖鏈豐富，電鏡下可見一層很厚的茸毛狀結(jié) 構(gòu)，稱為糖衣glycocalyx或細(xì)胞衣cell coat。
　　二、細(xì)胞膜的主要功能
　�。ㄒ唬┪镔|(zhì)交換的通道
　　一些脂溶性物質(zhì)及氧氣、二氧化碳等，能以自由擴(kuò)散的方式通過細(xì)胞膜；而葡萄糖、氨基酸等可借助膜上的載體蛋白進(jìn)出細(xì)胞；細(xì)胞可通過細(xì)胞膜從周圍環(huán)境中攝入必需的營養(yǎng)物質(zhì)，排出代謝產(chǎn)物，進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)外的物質(zhì)交換。
　　（二）維持細(xì)胞的完整性
　　細(xì)胞膜為細(xì)胞界膜，能夠使細(xì)胞維持一定的形態(tài)，對(duì)細(xì)胞起保護(hù)作用。若細(xì)胞膜嚴(yán)重受損，可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
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