根據(jù)筆者多年相關研究經(jīng)驗,選擇應用較多的植物基因工程實驗27個匯編成書。包含植物基因克隆,植物的組織培養(yǎng)與遺傳轉化及分子檢測和植物基因的分子遺傳與生化研究三個專題部分;這些專題包括了從事相關專業(yè)的主要研究背景,原理和研究方法。本書可應用于植物分子生物學專業(yè)課程,還可應用于相關專業(yè)交叉學科。希望能夠讓相關領域的本科生、研究生和青年科研人員快速了解相關實驗原理,并掌握相關實驗操作。希望能夠讓相關領域的本科生、研究生和青年科研人員快速了解相關實驗原理,并掌握相關實驗操作。
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目錄
叢書序
本書序
第一部分 植物基因克。1)
實驗一植物葉片基因組的提取方法(2)
實驗二植物葉片總RNA的提取與cDNA的合成方法(3)
實驗三聚合酶鏈反應(6)
實驗四CaCl2法制備大腸桿菌感受態(tài)細胞DH5α的方法(11)
實驗五Inoue法制備大腸桿菌超級感受態(tài)的方法(13)
實驗六大腸桿菌DH5α的轉化方法(15)
實驗七植物基因的擴增與基于T載體連接的克隆方法(17)
實驗八大腸桿菌質(zhì)粒的提取方法(22)
實驗九農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞GV3101和EHA105的制備方法(25)
實驗十農(nóng)桿菌GV3101和EHA105轉化方法(27)
第二部分 植物的組織培養(yǎng)與遺傳轉化及分子檢測(30)
實驗十一擬南芥的栽培方法(31)
實驗十二擬南芥的無菌組織培養(yǎng)方法(34)
實驗十三農(nóng)桿菌GV3101介導的擬南芥遺傳轉化方法(37)
實驗十四擬南芥轉基因植株的篩選與PCR鑒定方法(38)
實驗十五水稻愈傷組織的培養(yǎng)與農(nóng)桿菌EHA105介導的水稻遺傳轉化方法(42)
實驗十六水稻轉基因植株的篩選與PCR鑒定方法(46)
實驗十七實時熒光定量PCR(49)
第三部分 植物基因的分子遺傳與生化研究(54)
實驗十八報告基因的融合表達方法(54)
實驗十九十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(60)
實驗二十植物總蛋白的雙向電泳方法(64)
實驗二十一原核表達系統(tǒng)中蛋白質(zhì)的誘導表達與純化方法(70)
實驗二十二甲醇酵母表達系統(tǒng)中蛋白質(zhì)的誘導表達與純化方法(76)
實驗二十三酵母雙雜交(81)
實驗二十四Westernblot方法(86)
實驗二十五免疫沉淀方法(90)
實驗二十六植物葉肉原生質(zhì)體的提取與質(zhì)粒的瞬時轉化方法(92)
實驗二十七基因槍介導的洋蔥表皮細胞的瞬時轉化方法(94)
主要參考文獻(97)
名詞索引(中英文對照)(98)