《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)（第二版）》：
　　2.定量測(cè)定
　　在溶液中，當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時(shí)，其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系，即IF=Kc，利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析，與紫外—可見分光光度法類似，熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。該法常用于測(cè)定氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸的含量。熒光定量測(cè)定的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高，例如維生素B2的測(cè)定限量可達(dá)0.001μg／mL，這一優(yōu)點(diǎn)使測(cè)定時(shí)所需要樣品量大大減少。該法還可應(yīng)用于酶的含量及酶反應(yīng)的速率測(cè)定等。
　　3.研究生物大分子的物理化學(xué)特性及分子結(jié)構(gòu)和構(gòu)象
　　熒光的激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、量子產(chǎn)率和熒光壽命等參數(shù)不僅和分子內(nèi)熒光發(fā)色基團(tuán)的本身結(jié)構(gòu)有關(guān)，而且還強(qiáng)烈地依賴于發(fā)色團(tuán)周圍的環(huán)境，即對(duì)周圍環(huán)境十分敏感。利用此特點(diǎn)可通過測(cè)定上述有關(guān)熒光參數(shù)的變化來研究熒光發(fā)色團(tuán)所在部位的微環(huán)境的特征及其變化。在此研究中，除了利用生物大分子本身具有的熒光發(fā)色團(tuán)（如色氨酸、酪氨酸、鳥苷酸等，此類熒光稱為內(nèi)源熒光）以外，可將一些特殊的熒光染料分子共價(jià)地結(jié)合或吸附到生物大分子上，通過測(cè)定該染料分子的熒光變化來研究生物大分子（這種染料分子被稱為“熒光探針”），它們發(fā)出的熒光一般稱為外源熒光。熒光探針的應(yīng)用，大大地開拓了熒光技術(shù)在生物學(xué)中的應(yīng)用范圍。
　　4.通過對(duì)熒光壽命、量子產(chǎn)率等參數(shù)研究生物分子間的能量轉(zhuǎn)移
　　如果兩種不同的熒光生色團(tuán)離得較近，且其中一種生色團(tuán)的熒光發(fā)射譜與另一種生色團(tuán)的激發(fā)譜有相當(dāng)程度的重疊。則當(dāng)?shù)谝环N熒光團(tuán)被激發(fā)時(shí)，另一種熒光團(tuán)卻因第一種生色團(tuán)激發(fā)能的轉(zhuǎn)移而被激發(fā)，這種現(xiàn)象稱為熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）。產(chǎn)生FRET時(shí)必須具備三個(gè)條件：D和A都能發(fā)光；D的反射譜和A的激發(fā)譜必須有部分重疊；D和A之間的距離必須小于10 nm。Forster由此推出E=R06／（R6+R06）。R0稱為臨界距離，定義為能量轉(zhuǎn)移效率為50%時(shí)兩個(gè)生色團(tuán)之間的距離，對(duì)于每個(gè)供體一受體時(shí)，R0是常數(shù)。R0可以根據(jù)受體的吸收譜和供體的發(fā)射譜、介質(zhì)的折射系數(shù)、供體和受體躍遷電偶極矩的朝向因子、供體在沒有受體存在時(shí)的量子產(chǎn)率等參數(shù)估算出來。根據(jù)轉(zhuǎn)移效率和R0，即可求出兩個(gè)生色團(tuán)之間的距離。
　　近年來人們趨于用熒光偏振隨時(shí)間的衰減來研究生物大分子動(dòng)力學(xué)。在這種方法中，激發(fā)光不是一連續(xù)的面偏振光，而是一偏振的光脈沖，因此測(cè)得的F／／和F是在兩個(gè)不同方向上偏振的熒光隨時(shí)間的衰減，它既和熒光壽命T有關(guān)，又與分子在溶液中的運(yùn)動(dòng)有關(guān)，因此常表示為F／／（f）和F□—（t）。由它們可得一相當(dāng)重要的物理量——各向異性參數(shù)A（t）。
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