生物化學(xué)是生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)等相關(guān)專(zhuān)業(yè)的一門(mén)必修課程,其內(nèi)容主要涵蓋蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、脂類(lèi)、核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能、代謝及其調(diào)控、遺傳信息等。生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是生物化學(xué)的配套實(shí)踐課程,通過(guò)讓學(xué)生動(dòng)手實(shí)踐生物物質(zhì)的分離、分析和鑒定,熟悉物質(zhì)代謝的研究方法,加深對(duì)生物化學(xué)知識(shí)的理解,提高學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力。生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)是生命科學(xué)研究領(lǐng)域、臨床診療應(yīng)用領(lǐng)域中的重要基礎(chǔ)技術(shù),是生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)等相關(guān)專(zhuān)業(yè)學(xué)生必須掌握的基本實(shí)踐技能。本教材適用于高等院校生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué),可供生物科學(xué)、生物技術(shù)、臨床醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、藥學(xué)、護(hù)理、應(yīng)用化學(xué)等專(zhuān)業(yè)選擇使用。
本教材包括生物物質(zhì)分離實(shí)驗(yàn)、生物物質(zhì)定量實(shí)驗(yàn)、生物物質(zhì)代謝實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)共四章二十九個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,特色是實(shí)驗(yàn)過(guò)程的可視化和教學(xué)引入的生活化。本教材設(shè)置了兩個(gè)熒光蛋白質(zhì)相關(guān)實(shí)驗(yàn),實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的可視化,改進(jìn)了脂肪酸氧化、血糖、乳酸脫氫酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶等的測(cè)定方法,通過(guò)酶偶聯(lián)法的實(shí)時(shí)檢測(cè)等,提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣和積極性。通過(guò)生活化問(wèn)題的教學(xué)引入以及教材內(nèi)容的分離、定量技術(shù)方法分類(lèi),培養(yǎng)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力,促進(jìn)學(xué)生對(duì)不同技術(shù)方法應(yīng)用的理解、體會(huì)。本教材中大部分實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目配有實(shí)驗(yàn)操作視頻,有利于學(xué)生的預(yù)習(xí)、復(fù)習(xí)。此外,本教材將實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)?zāi)康哪K分解為教學(xué)目標(biāo)的知識(shí)、能力和素養(yǎng)目標(biāo)三部分,有利于課程思政的系統(tǒng)設(shè)計(jì)與實(shí)施。
本教材獲浙江師范大學(xué)教材建設(shè)基金立項(xiàng)資助。編寫(xiě)團(tuán)隊(duì)依托浙江省一流本科課程和浙江省高等學(xué)校課程思政示范課程生物化學(xué)實(shí)驗(yàn),根據(jù)積累多年的一線實(shí)踐教學(xué)經(jīng)驗(yàn)和對(duì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)的改進(jìn),參考國(guó)內(nèi)外的教材,編寫(xiě)本教材。
鑒于編者水平和能力有限,疏漏之處在所難免,敬請(qǐng)讀者批評(píng)指正。
生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)
編者
2021年8月
第1章 生物物質(zhì)分離實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)一 氨基酸的分離紙層析法
實(shí)驗(yàn)二 氨基酸的分離離子交換層析法
實(shí)驗(yàn)三 糖的分離薄層層析法
實(shí)驗(yàn)四 血清蛋白的分離聚丙烯凝膠電泳
實(shí)驗(yàn)五 蛋白質(zhì)的分離十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)
實(shí)驗(yàn)六 熒光蛋白的分離凝膠層析
實(shí)驗(yàn)七 牛乳中酪蛋白的制備與鑒定
第二章 生物物質(zhì)定量實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定凱氏定氮法
實(shí)驗(yàn)二 蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定考馬斯亮藍(lán)染色法
實(shí)驗(yàn)三 質(zhì)粒脫氧核糖核酸(DNA)的提取與濃度測(cè)定
實(shí)驗(yàn)四 可溶性糖含量的測(cè)定蒽酮比色法
實(shí)驗(yàn)五 果膠含量的測(cè)定咔唑比色法
實(shí)驗(yàn)六 血糖含量的測(cè)定葡萄糖氧化酶法
實(shí)驗(yàn)七 糧食中脂肪含量的測(cè)定索氏提取法
實(shí)驗(yàn)八 油脂酸價(jià)的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)九 油脂過(guò)氧化值的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十 水果中維生素C含量的測(cè)定鉬酸銨法
實(shí)驗(yàn)十一 植物中過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十二 植物源酪氨酸酶抑制劑的篩選
實(shí)驗(yàn)十三 蔗糖酶米氏常數(shù)的測(cè)定
第三章 生物物質(zhì)代謝實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)一 乳酸脫氫酶(LDH)活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二 肝勻漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)三 脂肪酸氧化的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)四 尿液中尿酸含量的測(cè)定分光光度法
第四章 綜合性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)一 苯丙氨酸解氨酶的分離、活性與比活力的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)二 熒光蛋白的表達(dá)純化分析
實(shí)驗(yàn)三 小鼠血清清蛋白的分離純化與純度鑒定
實(shí)驗(yàn)四 細(xì)胞色素C的分離純化與純度鑒定
實(shí)驗(yàn)五 乳酸脫氫酶(LDH)同工酶的分離純化
附錄
附錄一 常用緩沖溶液的配制方法
附錄二 常用蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量(Mr)標(biāo)準(zhǔn)參照物
附錄三 實(shí)驗(yàn)室常用酸堿溶液的密度和濃度
附錄四 常見(jiàn)蛋白質(zhì)分子質(zhì)量參考值
附錄五 常見(jiàn)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)參考值
附錄六 硫酸銨飽和度常用表
參考文獻(xiàn)