實驗包括顯微儀器篇、基礎實驗篇、細胞培養(yǎng)篇、技能提高等4篇,包括顯微鏡的使用,主要細胞器的觀察,細胞培養(yǎng)方面的技術和方法及細胞遺傳方面的經(jīng)典實驗等方面內(nèi)容,力求用圖解方法將實驗過程的每一步驟詳細展示,使操作過程可視化,清晰,簡潔,便于學生按圖索驥。內(nèi)容涉及40個細胞生物學的基礎實驗和綜合實驗,其中,基礎性實驗能夠滿足不同的學校教學學時的實際教學需要;提高性的綜合性實驗可以幫助同學進行創(chuàng)新課題的研究。內(nèi)容涉及40個細胞生物學的基礎實驗和綜合實驗,讀者可根據(jù)自己學生的實際情況、不同實驗學時數(shù)來選用相應的章節(jié),
余光輝 中南民族大學教授,博士生導師。國家民委中青年英才計劃入選者,湖北省杰出青年基金獲得者。華南師范大學碩士、武漢大學博士學位。德國Universita?tHohenheim、加拿大UniversityofGuelph,英國UniversityofWarwick訪問學者。 長期從事γ-氨基丁酸(GABA)信號在植物發(fā)育中的調(diào)控機制研究。主持和參與國家自然科學基金9項、主持湖北省自然科學基金杰出青年基金1項。出版十二五主編教材《圖解細胞生物學實驗教程》一部,獲中國石油和化學工業(yè)優(yōu)秀出版物獎(優(yōu)秀教材獎)二等獎。獲國家發(fā)明專利7項,成果轉化1項。
顯微儀器篇1
【實驗1】光學顯微鏡的使用及生物繪圖法練習1
【實驗2】熒光顯微鏡的操作和使用9
【實驗3】體視熒光顯微鏡使用操作19
【實驗4】共聚焦激光掃描顯微鏡(CLSM)的使用25
基礎實驗篇38
【實驗5】細胞大小和數(shù)目的測量及計算38
【實驗6】細胞膜的滲透性45
【實驗7】去污劑對紅細胞膜穩(wěn)定性的影響49
【實驗8】植物凝集素對紅細胞的凝集反應52
【實驗9】線粒體和液泡系的超活染色與觀察54
【實驗10】葉綠體的分離與熒光觀察59
【實驗11】線粒體和細胞核的制備與觀察63
【實驗12】酸性磷酸酶的顯示方法67
【實驗13】植物細胞骨架的光學顯微鏡觀察71
【實驗14】植物細胞胞間連絲的光學顯微鏡觀察74
【實驗15】DNA的孚爾根(Feulgen)核反應染色法75
【實驗16】放線菌素D誘導細胞凋亡的形態(tài)學觀察78
【實驗17】植物細胞程序性死亡的誘導和梯狀DNA的觀察81
【實驗18】雷帕霉素誘導細胞自噬的觀察87
細胞培養(yǎng)篇90
【實驗19】煙草葉片愈傷組織的誘導和培養(yǎng)90
【實驗20】煙草BY2細胞的同步化培養(yǎng)93
【實驗21】煙草葉肉原生質體的分離、融合與培養(yǎng)100
【實驗22】雞胚細胞的原代培養(yǎng)104
【實驗23】HeLa細胞的傳代培養(yǎng)109
【實驗24】小鼠顱蓋骨成骨細胞的原代培養(yǎng)112
【實驗25】動物細胞的凍存和復蘇117
【實驗26】動物細胞融合實驗121
【實驗27】小鼠腎臟單細胞懸浮液制備123
技能提高篇127
【實驗28】擬南芥綠色熒光蛋白標記基因的遺傳轉化127
【實驗29】去壁低滲火焰干燥法制備植物染色體標本134
【實驗30】熒光原位雜交和雜交信號檢測137
【實驗31】辣椒花藥發(fā)育過程中Ca2+分布對熱脅迫響應的電鏡觀察142
【實驗32】細胞核倍性水平的流式細胞術檢測148
【實驗33】7500熒光PCR儀的使用方法153
【實驗34】動物組織石蠟切片制作以及HE染色159
【實驗35】擬南芥胚胎的mPSPI染色觀察161
【實驗36】染色體展片法觀察植物雄性減數(shù)分裂的染色體行為164
【實驗37】芽殖酵母有絲分裂中紡錘體和染色體著絲粒的觀察167
【實驗38】海馬腦片免疫熒光染色171
【實驗39】海馬神經(jīng)元培養(yǎng)和觀察173
【實驗40】植物葉片動作電位的檢測176
附錄185
附錄1光學顯微鏡的合軸調(diào)節(jié)185
附錄2光學顯微鏡的物鏡分類185
附錄3光學顯微鏡有關術語187
附錄4熒光顯微鏡標本制作及觀察要求188
附錄5本教程涉及的主要常見試劑配制方法188
附錄6離心機的使用要點和注意事項193
附錄7722分光光度計的使用要點194
附錄8分光光度計基礎知識194
附錄9離心機轉數(shù)與離心力的列線圖195
附錄10硫酸銨溶液飽和度計算表(25℃)196
附錄11細胞化學組織技術介紹196
附錄12CTAB法提取洋蔥基因組DNA197
附錄13常見的植物激素配制方法197
附錄14原代細胞的培養(yǎng)方法198
附錄15農(nóng)桿菌Ti質粒結構和功能介紹200
附錄16流式細胞術所用到的解離液及其配方201
附錄17蘇木精和伊紅溶液的配制方法202