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黑果枸杞組培無性系的刺
黑果枸杞(Lyciumruthenicum)為茄科枸杞屬灌木,其兼具抗旱、抗寒、耐鹽堿、耐踐踏等特性。黑果枸杞是非常重要的生態(tài)經(jīng)濟樹種,開發(fā)利用前景廣闊。植物刺類型多樣,可分為枝刺(莖刺)、葉刺、皮刺、葉面刺、果實刺和葉緣刺等。野生黑果枸杞整株布滿枝刺,枝刺起源于葉腋處的刺原基,有維管組織與莖相連,堅硬不易剝離。枝刺不但給造林者、管理者及采摘者造成極大困擾,而且降低了經(jīng)濟林的總體效益。枝刺是影響采果類經(jīng)濟樹種的不利性狀,其無刺或刺弱化類型更易做經(jīng)濟林栽培。通過遠(yuǎn)緣雜交和調(diào)查,均未發(fā)現(xiàn)果實黑色且無刺(或刺弱化)的理想枸杞。培育無刺或刺弱化的黑果枸杞迫在眉睫。深入到分子層面的枝刺研究,難度大且起步較晚。我們的實驗發(fā)現(xiàn)黑果枸杞種子萌發(fā)為種苗后,均會快速形成莖刺。但是,令人振奮的是,我們發(fā)現(xiàn)黑果枸杞的組培無性系在試管內(nèi)時均無刺;這些植株移栽盆內(nèi)置于玻璃溫室內(nèi),還會有部分植株長期維持無刺狀態(tài);而同一無性系的其他植株有刺。同一無性系的有刺和無刺植株是珍貴且值得繼續(xù)研究的材料。因此,我們課題組基于此材料開展了刺形態(tài)發(fā)育觀察,鎖定繼續(xù)研究的取材部位。生理實驗發(fā)現(xiàn)蔗糖促進該無性系枝刺發(fā)生,生長素IAA抑制該無性系枝刺發(fā)生。基于此,我們又繼續(xù)探索了蔗糖促進枝刺發(fā)生和IAA抑制枝刺發(fā)生的相關(guān)基因及機理。然后,我們建立了黑果枸杞農(nóng)桿菌介導(dǎo)的穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化體系,通過轉(zhuǎn)基因開展基因功能研究,以期培育出無刺或刺弱化黑果枸杞。本書將詳細(xì)介紹以黑果枸杞莖、葉和未開放花朵為外植體的組織培養(yǎng)(組培),組培植株移栽及養(yǎng)護,組培植株刺表型及其發(fā)育觀察,蔗糖促進黑果枸杞組培無性系枝刺發(fā)生的機理探索,生長素IAA抑制黑果枸杞組培無性系枝刺發(fā)生機理探索,基于穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化研究LrSUS對黑果枸杞枝刺發(fā)生的影響這幾部分內(nèi)容。
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