《微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》,本書共分免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、病原微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、藥物微生物鑒定實(shí)驗(yàn)、附錄四個(gè)部分。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與規(guī)劃教材相匹配,以基本技能實(shí)驗(yàn)為主,體現(xiàn)重基礎(chǔ)的原則,同時(shí)增加了當(dāng)前免疫學(xué)研究常用的前沿技術(shù);實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目多樣化、多層次性,可供不同專業(yè),不同層次授課對像選用;避免了微生物學(xué)與免疫學(xué)相同技術(shù)的重復(fù)性;增加了藥物微生物鑒定實(shí)驗(yàn),適合醫(yī)藥院校本科、研究生等使用。
隨著生命科學(xué)的發(fā)展,微生物學(xué)與免疫學(xué)已滲透到生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,成為生命科學(xué)及相關(guān)學(xué)科與科研不可缺少的部分,微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)也是醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、生物技術(shù)等專業(yè)本科學(xué)生必修的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課程。為了適應(yīng)現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,適應(yīng)高校教學(xué)改革,提高教學(xué)質(zhì)量,培養(yǎng)開拓、創(chuàng)新型高級人才,我們根據(jù)多年的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)和生命科學(xué)發(fā)展趨勢,在傳統(tǒng)微生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,探討新的實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法,編寫了本實(shí)驗(yàn)教程。本實(shí)驗(yàn)教材可供高等醫(yī)藥院校各專業(yè)、各層次學(xué)生選用。本實(shí)驗(yàn)教程由免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、病原微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、藥物微生物學(xué)檢查及附錄四個(gè)部分組成。第一部分除了介紹免疫學(xué)基本技術(shù)操作外,還系統(tǒng)介紹了當(dāng)前免疫學(xué)研究常用的免疫熒光、免疫組織化學(xué)、免疫印跡、免疫膠體金、化學(xué)發(fā)光免疫分析等技術(shù)的原理、種類、應(yīng)用和前沿發(fā)展?fàn)顩r;第二部分和第三部分所選實(shí)驗(yàn)與規(guī)劃教材相匹配,對每個(gè)實(shí)驗(yàn)的基本原理、試劑配制、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)器材等都做了較為詳細(xì)的敘述。通過較系統(tǒng)的訓(xùn)練,培養(yǎng)學(xué)生的邏輯思維、綜合應(yīng)用及動(dòng)手操作能力,建立提高學(xué)生實(shí)踐技能和科研能力培養(yǎng)的課程體系,為今后科研工作打下良好的基礎(chǔ)。在編寫過程中,我們既要考慮配合課堂理論學(xué)習(xí),又要注意訓(xùn)練學(xué)生的基本操作和基本技能,同時(shí)也增加了反映新技術(shù)、新方法的內(nèi)容。我們力求保證每個(gè)實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性、實(shí)用性和可靠性,對其中基本原理、試劑配制、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)器材等都做了較為詳細(xì)的敘述。我們還對常用的實(shí)驗(yàn)儀器使用方法、樣品的制備、試劑的配制等做了詳細(xì)的介紹,使學(xué)生使用時(shí)更方便、易懂。本教材是由編寫團(tuán)隊(duì)在總結(jié)多年微生物與免疫實(shí)驗(yàn)教學(xué)的基礎(chǔ)上,總結(jié)經(jīng)驗(yàn),不斷完善并進(jìn)一步修訂而成的,但由于水平有限,在實(shí)驗(yàn)選材、編排上難免有不妥之處,懇請讀者在使用中提出寶貴意見。
編者2014年1月
第1部分 免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)
1抗原抗體反應(yīng)
1.1凝集反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)1直接凝集試驗(yàn)(玻片法)
實(shí)驗(yàn)2直接凝集試驗(yàn)(試管法)
附1:間接凝集試驗(yàn)
附2:間接凝集抑制試驗(yàn)
1.2沉淀反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)3單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)4雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)5對流免疫電泳試驗(yàn)
附3:免疫電泳試驗(yàn)
1.3補(bǔ)體測定
實(shí)驗(yàn)6補(bǔ)體介導(dǎo)的溶血反應(yīng)
1.4免疫標(biāo)記技術(shù)
第1部分 免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)
1抗原抗體反應(yīng)
1.1凝集反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)1直接凝集試驗(yàn)(玻片法)
實(shí)驗(yàn)2直接凝集試驗(yàn)(試管法)
附1:間接凝集試驗(yàn)
附2:間接凝集抑制試驗(yàn)
1.2沉淀反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)3單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)4雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)5對流免疫電泳試驗(yàn)
附3:免疫電泳試驗(yàn)
1.3補(bǔ)體測定
實(shí)驗(yàn)6補(bǔ)體介導(dǎo)的溶血反應(yīng)
1.4免疫標(biāo)記技術(shù)
實(shí)驗(yàn)7酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(直接法)
附4:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(間接法)
附5:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(夾心法)
實(shí)驗(yàn)8間接免疫熒光試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)9免疫膠體金試驗(yàn)
2免疫細(xì)胞檢測技術(shù)
2.1免疫細(xì)胞的分離
實(shí)驗(yàn)10外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離
實(shí)驗(yàn)11T、B淋巴細(xì)胞的分離
附6:免疫細(xì)胞分選(免疫磁珠法)
2.2免疫細(xì)胞數(shù)量的檢測
實(shí)驗(yàn)12E花環(huán)形成試驗(yàn)
2.3免疫細(xì)胞功能的檢測
實(shí)驗(yàn)13中性粒細(xì)胞吞噬功能檢測
實(shí)驗(yàn)14巨噬細(xì)胞吞噬功能檢測
實(shí)驗(yàn)15淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(MTT法)
附7:淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(3H_TdR標(biāo)記法)
實(shí)驗(yàn)16細(xì)胞毒性T細(xì)胞殺傷功能測定
實(shí)驗(yàn)17NK細(xì)胞活性測定
附8:免疫印跡試驗(yàn)
附9:免疫組織化學(xué)試驗(yàn)
附10:化學(xué)發(fā)光免疫分析試驗(yàn)
附11:ELISA法檢測HBsAg
第2部分 病原微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
3微生物學(xué)基本技能實(shí)驗(yàn)
3.1微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備
實(shí)驗(yàn)18微生物實(shí)驗(yàn)常用儀器設(shè)備
實(shí)驗(yàn)19光學(xué)顯微鏡油鏡的使用
3.2細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查
實(shí)驗(yàn)20細(xì)菌的基本形態(tài)、特殊結(jié)構(gòu)觀察
實(shí)驗(yàn)21革蘭染色法
實(shí)驗(yàn)22細(xì)菌動(dòng)力檢查法
3.3細(xì)菌的人工培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)23制備常用培養(yǎng)基
實(shí)驗(yàn)24細(xì)菌培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)25細(xì)菌生長現(xiàn)象觀察
3.4細(xì)菌的生化反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)26糖發(fā)酵試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)27吲哚試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)28甲基紅(M.R)試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)29乙酰甲基甲醇(V-P)試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)30檸檬酸鹽利用試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)31硫化氫試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)32硝酸鹽還原試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)33石蕊牛乳試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)34明膠液化試驗(yàn)
3.5細(xì)菌的藥物敏感性試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)35細(xì)菌對抗生素的敏感性試驗(yàn)(紙片擴(kuò)散法)
實(shí)驗(yàn)36細(xì)菌對中草藥的敏感性試驗(yàn)(打孔法)
實(shí)驗(yàn)37細(xì)菌對中草藥的敏感性試驗(yàn)(試管稀釋法)
3.6分子微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)38細(xì)菌DNA的提取
實(shí)驗(yàn)39質(zhì)粒DNA的提取
實(shí)驗(yàn)40DNA重組技術(shù)
實(shí)驗(yàn)41PCR技術(shù)
附12:細(xì)菌培養(yǎng)及檢測程序
4病原微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
4.1病原微生物的形態(tài)檢測
實(shí)驗(yàn)42病原性球菌的形態(tài)及培養(yǎng)物觀察
實(shí)驗(yàn)43腸道桿菌的形態(tài)及培養(yǎng)物觀察
實(shí)驗(yàn)44其他病原微生物的形態(tài)及培養(yǎng)物觀察
4.2病原微生物的其他檢測方法
實(shí)驗(yàn)45血漿凝固酶試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)46抗鏈球菌溶血素“()”試驗(yàn)(乳膠凝集法)
實(shí)驗(yàn)47肥達(dá)反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)48結(jié)核分枝桿菌抗酸染色法
實(shí)驗(yàn)49病毒雞胚培養(yǎng)法
實(shí)驗(yàn)50流感病毒的紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)
附13:糞便標(biāo)本中腸道桿菌的分離鑒定
第3部分 藥物微生物學(xué)檢查
實(shí)驗(yàn)51注射藥物的無菌檢查
實(shí)驗(yàn)52口服藥物的微生物學(xué)檢查
實(shí)驗(yàn)53外用藥物的微生物學(xué)檢查
實(shí)驗(yàn)54細(xì)菌內(nèi)毒素的檢測
附14:藥品微生物限度檢查
附15:土壤中抗生素產(chǎn)生菌的分離
第4部分 附錄
附錄1實(shí)驗(yàn)室安全及防護(hù)知識(shí)
附錄2免疫血清制備、鑒定、純化及保存
附錄3常用培養(yǎng)基的制備
附錄4常用染色液的配制
附錄5常用溶液的配制
附錄6微生物菌種的保藏
附錄7常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及基本技術(shù)
附錄8顯微鏡技術(shù)
參考文獻(xiàn)