基礎(chǔ)生物化學實驗》作為一本面向臨床醫(yī)學、藥學及相關(guān)專業(yè)本科生的實驗教材,自2004年8月出版以來,已在多所醫(yī)藥院校使用,并受到廣大師生的好評與歡迎。隨著生物化學學科的發(fā)展,特別是生物化學理論與技術(shù)在醫(yī)藥領(lǐng)域越來越廣泛的應(yīng)用,醫(yī)藥院校的學生對生物化學實驗技能有了新的需求,教材內(nèi)容需要更新。因此,我們根據(jù)學科發(fā)展,并針對培養(yǎng)對象,對本教材進行修訂。
第二版教材是在第一版教材的基本框架和基本內(nèi)容的基礎(chǔ)上進行修訂的。編者一致認為,本書的突出之處在于“基礎(chǔ)”二字。本著鞏固、完善和提高的修訂原則,力圖在強調(diào)基礎(chǔ)知識與基本技能的同時,反映生物化學實驗技術(shù)的科學性與先進性。本次修訂進行了數(shù)據(jù)更新和內(nèi)容完善,同時增刪了部分實驗,充實了思考題、綜合實驗,重編了設(shè)計實驗及病例討論。
全書仍分為六篇:第一篇概論,介紹實驗室基本常識與生物化學實驗基本操作;第二篇介紹分光光度法、層析技術(shù)、電泳技術(shù)、離心技術(shù)、透析技術(shù)等常用生物化學實驗技術(shù);第三篇包括糖、脂、蛋白質(zhì)、核酸、酶、新陳代謝等37個基礎(chǔ)生物化學實驗;第四篇包括質(zhì)粒DNA提取及酶解鑒定、聚合酶鏈反應(yīng)等基礎(chǔ)分子生物學實驗;第五篇為綜合實驗及設(shè)計實驗和病例討論,旨在培養(yǎng)學生的綜合應(yīng)用能力、分析與設(shè)計能力、邏輯思維能力;第六篇附錄,包括常用洗滌液的配制、一般化學試劑的分級、實驗室常用酸堿制劑的比重和濃度、實驗室常用緩沖液的配制、硫酸銨飽和度常用表、基礎(chǔ)生物化學實驗常用中英文對照,可供使用者查閱。
第一篇 概論
第一章 實驗基本常識
第二章 生物化學實驗基本操作
第二篇 常用生物化學實驗技術(shù)
第三章 分光光度法
第四章 層析技術(shù)
第五章 電泳技術(shù)
第六章 離心技術(shù)
第七章 透析技術(shù)
第三篇 基礎(chǔ)生物化學實驗
第八章 糖
實驗一 糖類的性質(zhì)實驗(一):糖類的顏色反應(yīng)
實驗二 糖類的性質(zhì)實驗(二):糖類的還原作用
實驗三 總糖的測定:蒽酮比色法
實驗四 糖的薄層層析 第一篇 概論
第一章 實驗基本常識
第二章 生物化學實驗基本操作
第二篇 常用生物化學實驗技術(shù)
第三章 分光光度法
第四章 層析技術(shù)
第五章 電泳技術(shù)
第六章 離心技術(shù)
第七章 透析技術(shù)
第三篇 基礎(chǔ)生物化學實驗
第八章 糖
實驗一 糖類的性質(zhì)實驗(一):糖類的顏色反應(yīng)
實驗二 糖類的性質(zhì)實驗(二):糖類的還原作用
實驗三 總糖的測定:蒽酮比色法
實驗四 糖的薄層層析
第九章 脂
實驗五 酮體的生成與鑒定
實驗六 血清總膽固醇測定(硫磷鐵法)
實驗七 血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳
實驗八 血漿高密度脂蛋白一膽固醇含量的測定(肝素-Mn法)
第十章 蛋白質(zhì)
實驗九 蛋白質(zhì)的性質(zhì)實驗(一):蛋白質(zhì)等電點的測定
實驗十 蛋白質(zhì)的性質(zhì)實驗(二):蛋白質(zhì)的沉淀及變性
實驗十一 蛋白質(zhì)的透析
實驗十二 蛋白質(zhì)定量分析(一):紫外分光光度法
實驗十三 蛋白質(zhì)定量分析(二):酚試劑法
實驗十四 蛋白質(zhì)定量分析(三):雙縮脲法
實驗十五 蛋白質(zhì)定量分析(四):考馬斯亮藍G-250染色法
實驗十六 血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳
實驗十七 血清蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳
實驗十八 血清蛋白聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳
實驗十九 SDS—PAGE測定蛋白質(zhì)分子量
實驗二十 凝膠層析(分子篩層析)
實驗二十一 離子交換層析分離氨基酸
第十一章 核酸
實驗二十二 核酸定量分析(一):紫外分光光度法
實驗二十三 核酸定量分析(二):地衣酚法
實驗二十四 核酸定量分析(三):二苯胺法
實驗二十五 DNA的瓊脂糖凝膠電泳及其檢測
實驗二十六 肝細胞核的分離提純,細胞核DNA的提取、水解與鑒定
第十二章 酶
實驗二十七 脲酶米氏常數(shù)的測定
實驗二十八 細胞色素體系的作用及其抑制
實驗二十九 乳酸脫氫酶及其輔酶的作用
實驗三十 酶的競爭性抑制作用
第十三章 新陳代謝
實驗三十一 血糖測定(一):鄰甲苯胺法
實驗三十二 血糖測定(二):葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法
實驗三十三 胰島素、腎上腺素對血糖濃度的影響
實驗三十四 肝糖原的提取與鑒定
實驗三十五 血清尿素氮的測定
第一章 實驗基本常識
一、實驗須知
(一)生物化學實驗的目的
1.讓學生掌握基本的生物化學實驗操作及技能。
2.使學生加深對生物化學理論知識的理解。
3.培養(yǎng)學生科學地分析問題和解決問題的能力,以及創(chuàng)新求實的工作作風。
(二)實驗室規(guī)則及常識
1.嚴格遵守實驗課紀律,不遲到,不早退。必須穿白大衣進入實驗室。
2.不得高聲說話,嚴禁用器械及動物開玩笑。
3.取用試劑時必須“蓋隨瓶走”,用后立即蓋好放回原處,切忌“張冠李戴”。
4.愛護公物,節(jié)約水、電、試劑,遵守損壞儀器報告、登記、賠償制度。
5.嚴格按操作規(guī)程使用儀器,凡不熟悉操作方法的儀器不得隨意動用,對貴重儀器必須先熟知使用方法,才能開始使用;儀器發(fā)生故障,應(yīng)立即關(guān)閉電源并報告老師,不得擅自拆修。
6.實驗完畢將有關(guān)儀器器材洗凈歸置好,值日生負責整個實驗室的清潔和整理,保持實驗室整潔。
(三)生物化學實驗課的要求
1.實驗課前要充分預(yù)習,明確實驗?zāi)康、原理、操作步驟及注意事項等,寫出預(yù)習報告。
2.實驗過程中不做與實驗無關(guān)的事情,也不能妨礙他人實驗。
3.加強基本技術(shù)訓(xùn)練,如移液、混勻、過濾等。
4.熟悉常用儀器的使用方法,如分光光度計、離心機、電泳儀等。
5.以實事求是的科學態(tài)度如賣記錄實驗結(jié)果,仔細分析,作出客觀結(jié)論。實驗失敗,須認真查找原因,而不要任意涂改實驗結(jié)果。
6.及時寫好實驗報告并按時上交。
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